未知蛋白樣品濃度的測定對于準確理解蛋白質的功能和其在疾病中的角色有著至關重要的作用。測定蛋白質濃度常用的技術包括Bradford蛋白測定法、Lowry蛋白測定法和比氏蛋白測定法。Bradford法主要基于溴酚藍在酸性條件下與蛋白質結合生成藍色復合物,通過紫外可見光光譜法進行定性定量分析。Lowry法則利用酪氨酸和半胱氨酸在銅離子催化下與茚三酮反應,形成藍紫色物質。比氏蛋白測定法則是基于牛血清蛋白與酪氨酸和半胱氨酸在銅離子催化下形成藍紫色物質的原理。
通過以上未知蛋白樣品濃度的測定方法,可以依據測量結果來推測蛋白質的存在量,從而對蛋白質的功能進行初步假設。然而,任何一種測定方法都有其局限性,例如可能受到樣品復雜性、蛋白質種類和濃度差異等因素的影響。因此,選擇適當的測定方法以及對測定結果的合理解讀是科研過程中的重要步驟。
常見問題:
Q1. 對于不同的未知蛋白樣品濃度的測定方法,如何選擇最適合的一種?
A:選擇蛋白質濃度測定方法需要考慮研究目標、樣品性質(如蛋白質種類和濃度)、可用設備以及測定精度等因素。一般來說,Bradford法適用于濃度稍高的樣品,而Lowry法和比氏法適用于濃度較低的樣品。
Q2. 如何處理測定過程中可能出現的干擾因素?
A:在測定過程中,可能存在諸如其他生物分子、溶劑殘留、pH值、溫度等干擾因素。需要通過優(yōu)化實驗條件、使用質控樣品等手段減少這些干擾。在數據分析階段,可以通過統(tǒng)計方法處理偶然的測量誤差。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對蛋白質序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對蛋白質的氨基酸組成分析,N端測序,C端測序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質,提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優(yōu)勢:
1.采用目前世界上先進的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量蛋白質組學、靶向蛋白質組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優(yōu)勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現新的生物標記物;
2.體內體外多種蛋白質標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.專業(yè)生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,最后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優(yōu)勢:
1.技術先進,填補技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題??稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從最小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從蛋白質、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產商提高生物藥物品質。
百泰派克生物科技(BTP)采用優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)為您提供高通量基因敲除服務,包括病毒包裝、質粒制備、Cas9濃度測試等,為您解決選擇哪個細胞進行敲除、可不可以敲除、如何敲除以及敲除效率如何等關鍵問題??蛇M行單/多基因敲除、移碼突變和大序列敲除。我們的人全基因組基因敲除陣列Array文庫覆蓋了完整的人類全基因組,全基因組陣列敲除庫已在人原代細胞全部完成高內涵篩選的驗證,超過80%以上的靶點達到70%以上的敲除效率。
※服務優(yōu)勢:
1.樣本適用性強
適用于人、小鼠的細胞系,原代細胞,免疫細胞及iPS細胞等。
2.基因必要性及表達量分析
在進行基因敲除實驗前,我們會基于生物信息學和蛋白質組學數據對不同細胞中基因必要性及表達量進行分析,確保實驗的可行性,降低實驗風險。
3.gRNA無需從頭設計和驗證
我們完成了人類全基因組gRNA的全部驗證,與藥物相關的靶點也完成了PCR測序驗證,無需針對客戶的靶點設計預實驗進行gRNA驗證,大大縮短了項目周期。
4.高通量高效率
我們采用優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)進行高通量基因敲除,多個sgRNA/靶基因設計保證高敲除效率,超過80%靶點敲除效率在70%以上,短期內(10天內)即可提供高敲除效率的KO pool,滿足絕大多數的應用場景。
5.敲除效率雙驗證
基因敲除后,我們采用WB實驗中抗體KO驗證的首選方法——Sanger測序和深度蛋白質組學技術對敲除效率進行雙驗證,數據真實性的雙重保障。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等專業(yè)服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,專業(yè)提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務;
3.業(yè)務范圍覆蓋蛋白質組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
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未知蛋白樣品濃度的測定方法由北京百泰派克生物科技有限公司為您提供,如您想了解更多關于未知蛋白樣品濃度的測定方法 報價、型號、參數等信息,歡迎來電或留言咨詢。
注:該產品未在中華人民共和國食品藥品監(jiān)督管理部門申請醫(yī)療器械注冊和備案,不可用于臨床診斷或治療等相關用途。