測(cè)定氨基酸的序列最常用的技術(shù)是Edman降解法,該方法通過(guò)連續(xù)地移除蛋白質(zhì)N端的氨基酸,一步步地揭示蛋白質(zhì)的氨基酸序列。首先,蛋白質(zhì)與Edman試劑反應(yīng),使N端的氨基酸形成一個(gè)可溶的衍生物。然后,通過(guò)酸性條件下的熱處理將其從蛋白質(zhì)中剝離,進(jìn)而進(jìn)行高效液相色譜(HPLC)分析,以確定被剝離的氨基酸的性質(zhì)。通過(guò)重復(fù)此過(guò)程,可以測(cè)定氨基酸的序列。
然而,這種方法也存在局限性,例如它無(wú)法分析大于50個(gè)氨基酸殘基的蛋白質(zhì)。因此,對(duì)于大型蛋白質(zhì),通常需要使用另一種技術(shù)——質(zhì)譜法來(lái)測(cè)定氨基酸的序列。質(zhì)譜法可以通過(guò)測(cè)量氨基酸或肽段離子的質(zhì)量和電荷,確定它們的氨基酸序列。首先,蛋白質(zhì)被切割成較小的肽段,然后利用電離源將其轉(zhuǎn)化為帶電粒子。這些離子被加速并通過(guò)一個(gè)磁場(chǎng),由于質(zhì)量和電荷的差異,不同的離子會(huì)在不同的地方到達(dá)探測(cè)器,從而實(shí)現(xiàn)氨基酸的序列測(cè)定。
常見(jiàn)問(wèn)題:
Q1. 測(cè)定氨基酸的序列在生物制藥領(lǐng)域有何應(yīng)用?
A:在生物藥品(如抗體藥物)的制造過(guò)程中,測(cè)定氨基酸的序列能夠確保生產(chǎn)的蛋白質(zhì)與設(shè)計(jì)的目標(biāo)序列一致,從而保證藥物的質(zhì)量和安全性。同時(shí),也能用于藥物開(kāi)發(fā)的早期階段,比如在開(kāi)發(fā)新的生物相似藥時(shí),需要確保其氨基酸序列與原始藥物一致。
Q2. 測(cè)定氨基酸的序列在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究中的作用是什么?
A:蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能由其氨基酸序列決定。因此,通過(guò)測(cè)定氨基酸的序列,研究人員可以預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu),理解它的功能機(jī)制,甚至設(shè)計(jì)出改良版本的蛋白質(zhì)。
特色項(xiàng)目
一、蛋白測(cè)序
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)蛋白質(zhì)序列進(jìn)行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù),包括對(duì)蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析,N端測(cè)序,C端測(cè)序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白質(zhì)N端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的蛋白質(zhì),提供基于從頭測(cè)序法的蛋白質(zhì)從頭測(cè)序服務(wù),對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。
※服務(wù)優(yōu)勢(shì):
1.采用目前世界上先進(jìn)的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;
4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測(cè);
6.測(cè)序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
二、蛋白質(zhì)組學(xué)
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC,提供定量蛋白質(zhì)組學(xué)、靶向蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù)。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù),助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。
※服務(wù)優(yōu)勢(shì):
1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;
2.體內(nèi)體外多種蛋白質(zhì)標(biāo)記方法,適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;
3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;
4.可檢測(cè)較低豐度蛋白,線(xiàn)性范圍廣;
5.專(zhuān)業(yè)生物信息學(xué)分析,分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。
三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析
百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,采用金屬元素標(biāo)記物(通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體)標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,最后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。
※服務(wù)優(yōu)勢(shì):
1.技術(shù)先進(jìn),填補(bǔ)技術(shù)空白
采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題??稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征,百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。
2.分析數(shù)量大,成本較低
單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高,且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。
3.應(yīng)用前景大
①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)
百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專(zhuān)有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,可從最小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標(biāo)。
五、生物藥物表征
百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),MALDI TOF,高效色譜分離技術(shù),提供一系列完善的生物藥物分析方案,從蛋白質(zhì)、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。
六、基因敲除
百泰派克生物科技(BTP)采用優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)為您提供高通量基因敲除服務(wù),包括病毒包裝、質(zhì)粒制備、Cas9濃度測(cè)試等,為您解決選擇哪個(gè)細(xì)胞進(jìn)行敲除、可不可以敲除、如何敲除以及敲除效率如何等關(guān)鍵問(wèn)題??蛇M(jìn)行單/多基因敲除、移碼突變和大序列敲除。我們的人全基因組基因敲除陣列Array文庫(kù)覆蓋了完整的人類(lèi)全基因組,全基因組陣列敲除庫(kù)已在人原代細(xì)胞全部完成高內(nèi)涵篩選的驗(yàn)證,超過(guò)80%以上的靶點(diǎn)達(dá)到70%以上的敲除效率。
※服務(wù)優(yōu)勢(shì):
1.樣本適用性強(qiáng)
適用于人、小鼠的細(xì)胞系,原代細(xì)胞,免疫細(xì)胞及iPS細(xì)胞等。
2.基因必要性及表達(dá)量分析
在進(jìn)行基因敲除實(shí)驗(yàn)前,我們會(huì)基于生物信息學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)對(duì)不同細(xì)胞中基因必要性及表達(dá)量進(jìn)行分析,確保實(shí)驗(yàn)的可行性,降低實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)。
3.gRNA無(wú)需從頭設(shè)計(jì)和驗(yàn)證
我們完成了人類(lèi)全基因組gRNA的全部驗(yàn)證,與藥物相關(guān)的靶點(diǎn)也完成了PCR測(cè)序驗(yàn)證,無(wú)需針對(duì)客戶(hù)的靶點(diǎn)設(shè)計(jì)預(yù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行g(shù)RNA驗(yàn)證,大大縮短了項(xiàng)目周期。
4.高通量高效率
我們采用優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)進(jìn)行高通量基因敲除,多個(gè)sgRNA/靶基因設(shè)計(jì)保證高敲除效率,超過(guò)80%靶點(diǎn)敲除效率在70%以上,短期內(nèi)(10天內(nèi))即可提供高敲除效率的KO pool,滿(mǎn)足絕大多數(shù)的應(yīng)用場(chǎng)景。
5.敲除效率雙驗(yàn)證
基因敲除后,我們采用WB實(shí)驗(yàn)中抗體KO驗(yàn)證的首選方法——Sanger測(cè)序和深度蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)敲除效率進(jìn)行雙驗(yàn)證,數(shù)據(jù)真實(shí)性的雙重保障。
百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等專(zhuān)業(yè)服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設(shè)備定期計(jì)量/期間核查,軟件審計(jì)追蹤,為客戶(hù)提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。
1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,專(zhuān)業(yè)提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù);
2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可,為客戶(hù)提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù);
3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等;
4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái),滿(mǎn)足您一站式服務(wù)需求;
5.服務(wù)3000+企業(yè),10000+客戶(hù)的選擇;
6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!
>>點(diǎn)擊了解更多優(yōu)質(zhì)服務(wù)項(xiàng)目
如何測(cè)定氨基酸的序列由北京百泰派克生物科技有限公司為您提供,如您想了解更多關(guān)于如何測(cè)定氨基酸的序列
報(bào)價(jià)、型號(hào)、參數(shù)等信息,歡迎來(lái)電或留言咨詢(xún)。
注:該產(chǎn)品未在中華人民共和國(guó)食品藥品監(jiān)督管理部門(mén)申請(qǐng)醫(yī)療器械注冊(cè)和備案,不可用于臨床診斷或治療等相關(guān)用途。