標(biāo)記轉(zhuǎn)移法結(jié)合交聯(lián)法,通過標(biāo)記與目標(biāo)蛋白質(zhì)相互作用的蛋白質(zhì)來研究蛋白質(zhì)之間的相互作用。此方法可用于發(fā)現(xiàn)新的相互作用,對(duì)通過其他技術(shù)檢測(cè)到的相互作用蛋白進(jìn)行驗(yàn)證,且可應(yīng)用于蛋白質(zhì)復(fù)合物的研究。另外,標(biāo)記轉(zhuǎn)移法可以檢測(cè)到微弱短暫的蛋白質(zhì)相互作用,這類相互作用通常無法通過免疫共沉淀法或Pull-Down法檢測(cè)。
在典型的標(biāo)記轉(zhuǎn)移分析中,誘餌蛋白首先與帶有放射性、熒光或生物素標(biāo)記的標(biāo)記轉(zhuǎn)移試劑(LTR)的反應(yīng)部分發(fā)生反應(yīng)。然后將標(biāo)記的誘餌蛋白與目標(biāo)蛋白在體外進(jìn)行相互作用,形成穩(wěn)定或暫時(shí)的復(fù)合物,再暴露于紫外線下激活交聯(lián)劑上的光敏基團(tuán)部分。其次與獵物蛋白共價(jià)結(jié)合。zui后,通過切割交聯(lián)劑間隔臂以釋放附著的誘餌蛋白,完成標(biāo)記轉(zhuǎn)移。
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標(biāo)記轉(zhuǎn)移法蛋白相互作用
熒光或放射性標(biāo)記的芳基疊氮化物、碳烯或二苯甲酮與激素、多肽或核酸連接,可用于標(biāo)記和探索先前未知的目標(biāo)蛋白。標(biāo)記轉(zhuǎn)移方法已廣泛應(yīng)用于核酸-蛋白質(zhì)相互作用檢查。利用zui新的標(biāo)記轉(zhuǎn)移策略,百泰派克生物科技可以根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo),選擇合適的交聯(lián)劑,并進(jìn)行后續(xù)分析,為您探索目標(biāo)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用助力。
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GST融合蛋白Pull-down技術(shù)結(jié)合質(zhì)譜聯(lián)用的蛋白互作分析
SILAC與免疫共沉淀結(jié)合質(zhì)譜聯(lián)用的蛋白互作分析
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