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活性α-突觸核蛋白纖維原,病理反應(yīng)見(jiàn)效快

上一篇 / 下一篇  2019-04-01 15:31:56/ 個(gè)人分類(lèi):重組蛋白

帕金森?。?/font>PD)又名震顫麻痹,是最常見(jiàn)的神經(jīng)退行性疾病之一。流行病學(xué)顯示,患病率為15~328/10萬(wàn)人口,>65歲人群約1%;發(fā)病率為10~21/10萬(wàn)人口/年。PD病因及發(fā)病機(jī)制尚未明確,可能與社會(huì)因素、藥物因素、患者因素等有關(guān)。

PD病理改變?yōu)椋褐心X黑質(zhì)致密部、藍(lán)斑神經(jīng)元色素脫失,黑質(zhì)色素變淡及出現(xiàn)路易小體。PD神經(jīng)生化改變?yōu)椋褐心X黑質(zhì)致密部、藍(lán)斑神經(jīng)元脫失致上述部位及其神經(jīng)末梢處多巴胺(DA)減少,(DA減少≥70%時(shí)產(chǎn)生PD臨床表現(xiàn)),而黑質(zhì)紋狀體系統(tǒng)中與DA功能拮抗的乙酰膽堿(ACH)作用相對(duì)亢進(jìn),DA與ACH平衡失調(diào)。 

目前市面上的α-突觸核蛋白均是無(wú)活性的,我們的活性聚集體可以模擬帕金森疾病模型,助力帕金森疾病的研究。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)StressMarq 研發(fā)出可以直接注射到活體內(nèi)產(chǎn)生病理反應(yīng)的活性α-突觸核蛋白纖維原,該方法制作疾病模型的時(shí)間要遠(yuǎn)遠(yuǎn)短于傳統(tǒng)的基因改造小鼠、大鼠。通常注射后30天即可見(jiàn)到病理反應(yīng),而基因改造模型需要9個(gè)月到1年時(shí)間。 

兩種α-突觸核蛋白聚集檢測(cè)方法: 

硫黃素T檢測(cè):硫黃素T (Thioflavin T) 是一種熒光染料,可以和富含β折疊的結(jié)構(gòu)結(jié)合,例如α-突觸核蛋白纖維原、Tau纖維原等。一旦結(jié)合,硫黃素T的發(fā)射光譜就會(huì)發(fā)生紅移 ,并且熒光強(qiáng)度會(huì)增強(qiáng),這是一個(gè)很好的用來(lái)檢測(cè)纖維原形成的測(cè)試。 

活性突觸核蛋白 (α-Syn) 聚合體 (SPR-322) 催化活性單體(SPR-321)形成新的聚合體. 

左側(cè)硫黃素 T 發(fā)射光曲線展示了四種試驗(yàn)對(duì)象隨時(shí)間增強(qiáng)的熒光強(qiáng)度(相關(guān)于α-Syn 蛋白聚合體),其中 10 nM 活性 α-Syn 聚合體(SPR-322) 與100 μm 活性 α-Syn 單體 (SPR-321) 混合物熒光增強(qiáng)最明顯, 另外幾組對(duì)比分別是活性 α-Syn 聚合物 (SPR-322) 、活性 α-Syn 單體 (SPR-321) 以及 Thioflavin T λex = 450 nm, λem = 485 nm. 

細(xì)胞檢測(cè):以下是使用被活性和對(duì)照α-突觸核蛋白前體纖維原(PFFs)處理的神經(jīng)元獲取ICC的圖片?;钚驭?突觸核蛋白PFFs處理的原代大鼠海馬體神經(jīng)元顯示了路易體的形成,而經(jīng)對(duì)照α-突觸核蛋白處理的神經(jīng)元沒(méi)有出現(xiàn)路易體形成。

D-F:被活性小鼠突觸核蛋白聚集體(SPR-324) 4 μg/ml處理后顯示路易體內(nèi)含物(綠色)的形成以及細(xì)胞減少,

A-C:被無(wú)活性的對(duì)照突觸核蛋白聚集體,處理時(shí)沒(méi)有路易體內(nèi)含物形成及細(xì)胞減少.  

組織: 原代海馬體神經(jīng)元(DIV16). 物種: 斯普拉-道來(lái)氏大鼠. 固定: 由PFA制作的3% 甲醛固定20分鐘. 阻斷: 1:1 PBS:LiCOR Odyssey Block (LiCOR, 927-40010) 以及 30 mL/mL, 0.1% triton-X 100 阻斷 30 分鐘. 一抗: 小鼠抗pSer129 抗體 (1:1000), 以及兔抗pSer129 (1:800), 4°C下處理24 小時(shí). 二抗: ATTO 546 驢抗小鼠 (1:700) 和 ATTO 488 驢抗兔 (1:700) 室溫下孵育一小時(shí) (復(fù)合圖綠色). 復(fù)染色: Hoechst (藍(lán)色) 細(xì)胞核染色, 1:3000 室溫下孵育1小時(shí). 細(xì)胞定位: 路易體內(nèi)含物. 放大倍數(shù): 20x.

D-F:原代大鼠海馬體神經(jīng)元被活性突觸核蛋白聚集體(SPR-322) 4 μg/ml處理后顯示路易體內(nèi)含物(綠色)的形成

A-C:被對(duì)照突觸核蛋白聚集體(SPR-317) 4 μg/ml處理時(shí)沒(méi)有路易體內(nèi)含物形成. 

組織: 原代海馬體神經(jīng)元. 物種: 斯普拉-道來(lái)氏大鼠. 固定: 由PFA制作的4% 甲醛. 一抗: 小鼠抗pSer129 抗體, 稀釋度 1:1000, 4°C下處理24 小時(shí). 二抗: FITC 羊抗小鼠 (綠色) 稀釋度 1:700室溫下孵育1小時(shí). 復(fù)染色: Hoechst (藍(lán)色) 細(xì)胞核染色, 1:4000 室溫下孵育1小時(shí). 細(xì)胞定位: 路易體內(nèi)含物. 放大倍數(shù): 20x. 

為了滿足不同客戶的研究需求,艾美捷科技為您推薦細(xì)胞應(yīng)激領(lǐng)域StressMarq研發(fā)的,針對(duì)α-突觸核蛋白單體、聚集體及多應(yīng)用,多種屬相關(guān)抗體:

 

產(chǎn)品名稱(chēng)

活性

應(yīng)用類(lèi)型

貨號(hào)

適用物種

重組人α-突觸核蛋白單體(對(duì)照)
重組人α-突觸核蛋白聚合體PFFs(對(duì)照)

Inactive

WB、SDS-PAGE、in vivo/vitro

SPR-316B
SPR-317B

 

重組人α-突觸核蛋白單體
重組人α-突觸核蛋白聚合體PFFs

Active

WB、SDS-PAGE、in vivo/vitro

SPR-321B
SPR-322B

 

重組小鼠α-突觸核蛋白單體
重組小鼠α-突觸核蛋白聚合體PFFs

Active

WB、SDS-PAGE、in vivo/vitro

SPR-323B
SPR-324B

 

小鼠抗小鼠α-突觸核蛋白單抗
小鼠抗小鼠α-突觸核蛋白單抗
小鼠抗小鼠α-突觸核蛋白單抗

 

WB、ICC/IF
WB、IHC、ICC/IF
WB、IHC、ICC/IF

SMC-531D
SMC-532D
SMC-533D

人、小鼠、大鼠
人、小鼠、大鼠
人、小鼠、大鼠

小鼠抗人α-突觸核蛋白單抗
兔抗人α-突觸核蛋白多抗

 

WB、ICC/IF
WB

SMC-530D
SPC-800D

人、小鼠、大鼠

α-突觸核蛋白 (磷酸化Ser129) 抗體
α-突觸核蛋白 (磷酸化Tyr136) 抗體

 

WB、ICC/IF
WB

SPC-742D
SPC-1435D

人、小鼠
人、小鼠、大鼠

*以上蛋白提供100ug ,200ug,500ug,抗體提供12ug, 100ug等不同規(guī)格的包裝,滿足您多樣化的需求。

*以上抗體可提供近17種偶聯(lián)直標(biāo)的抗體,包括:HRP,AP,生物素,鏈霉親和素,F(xiàn)ITC以及ATTO系列全光譜熒光染料。

 

廠家內(nèi)部質(zhì)檢:


StressMarq Biosciences Inc. 在2007年成立于加拿大維多利亞,是一家生物科技公司,專(zhuān)門(mén)從事試劑與試劑盒研究,服務(wù)范圍遍及全球50多個(gè)國(guó)家。 

StressMarq公司的核心技術(shù)領(lǐng)域?yàn)榧?xì)胞應(yīng)激(尤其是熱休克蛋白(HSP)領(lǐng)域),離子通道,載體研究,同時(shí)在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域推出特有的具有生物活性的Tau蛋白與a-突觸核蛋白。產(chǎn)品領(lǐng)域涉及到:細(xì)胞凋亡、細(xì)胞信號(hào)、通路和轉(zhuǎn)運(yùn)、細(xì)胞器標(biāo)志物、熱休克、神經(jīng)生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、氧化應(yīng)激、磷酸化運(yùn)輸?shù)取?nbsp;

除了提供用于進(jìn)一步研究的相關(guān)工具外,StressMarq還提供全新的尖端研究工具,用于開(kāi)發(fā)新的生物項(xiàng)目,包括a B晶體蛋白ELISA試劑盒(現(xiàn)在是公認(rèn)的乳腺癌標(biāo)志物);熱休克同源蛋白70(Hsc70)ELISA試劑盒;以及用于神經(jīng)衰退研究的Tau活性蛋白與a-突觸核蛋白。 

本公司已將專(zhuān)業(yè)技術(shù)擴(kuò)展到抗體、小分子離子通道與載體等更新領(lǐng)域,前者包括當(dāng)前熱門(mén)的核心領(lǐng)域:Nav、Cav、TRP、Kv、KCNQ、HCN,后者包括當(dāng)前熱門(mén)的核心領(lǐng)域:ENaC、NCC和NKCC2以及主要水通道蛋白載體。

作為StressMarq在中國(guó)的區(qū)域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供最全面

TAG: α-synuclein帕金森路易小體

 

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