帕金森病（Parkinson’s disease, PD）是最為流行的突觸核蛋白?。╯ynucleinopathy），也是第二大常見的神經(jīng)退行性疾病，影響著大約2%的60歲以上人群，發(fā)病率僅次于阿爾茨海默病。α-突觸核蛋白是帕金森病的發(fā)病機(jī)制中最重要的蛋白，因?yàn)樗?a href="javascript:;" onClick="javascript:tagshow(event, '%E8%B7%AF%E6%98%93%E5%B0%8F%E4%BD%93');" target="_self">路易小體的主要結(jié)構(gòu)成分，α-突觸核蛋白聚集與路易小體的形成及多巴胺能神經(jīng)元的死亡密切相關(guān)。

生理狀態(tài)突觸核蛋白包括包括α-突觸核蛋白（α-syn）、β-突觸核蛋白（β-syn）和γ- 突觸核蛋白（γ-syn）三種類型。α-突觸核蛋白單體由三部分組成：（1）氨基端：4個(gè)不完全重復(fù)序列的區(qū)域，是家族性PD基因突變的好發(fā)部位；（2）羧基端： 35個(gè)氨基酸殘基序列，包含兩個(gè)不完全重復(fù)的序列，具有很強(qiáng)的β折疊趨向，這些趨向是某些位點(diǎn)突變后造成突觸核蛋白單體之間聚集的重要原因。（3）NAC：區(qū)富含帶負(fù)電荷的酸性氨基酸，可以和重金屬結(jié)合發(fā)生聚集。 

α-突觸核蛋白在各種因素的影響下異常表達(dá)和聚集，這一過程產(chǎn)生的氧化應(yīng)激等生化反應(yīng)和寡聚體中間構(gòu)像等均在帕金森發(fā)病過程中起著重要的作用。生理狀態(tài)的α-突觸核蛋白為無序單體，病理狀態(tài)的突觸核蛋白為聚合狀態(tài)，即毒性α-突觸核蛋白。

上圖是α-突觸核蛋白聚集體（PFFs）的形成過程，我們的活性聚集體具有催化突觸核蛋白單體聚集形成活性聚集體的作用，我們稱之為“種子”，突觸核蛋白單體在正常人體內(nèi)就存在著，而在帕金森病人的大腦中這些單體聚集成了突觸核蛋白聚集體，連同其他一些蛋白形成了路易小體，沉淀在大腦中，使腦細(xì)胞死亡。

目前市面上的α-突觸核蛋白均是無活性的，我們的活性聚集體可以模擬帕金森疾病模型，助力帕金森疾病的研究。

產(chǎn)品優(yōu)勢：StressMarq 研發(fā)出可以直接注射到活體內(nèi)產(chǎn)生病理反應(yīng)的活性α-突觸核蛋白纖維原，該方法制作疾病模型的時(shí)間要遠(yuǎn)遠(yuǎn)短于傳統(tǒng)的基因改造小鼠、大鼠。通常注射后30天即可見到病理反應(yīng)，而基因改造模型需要9個(gè)月到1年時(shí)間。 

兩種α-突觸核蛋白聚集檢測方法： 

硫黃素T檢測：硫黃素T (Thioflavin T) 是一種熒光染料，可以和富含β折疊的結(jié)構(gòu)結(jié)合，例如α-突觸核蛋白纖維原、Tau纖維原等。一旦結(jié)合，硫黃素T的發(fā)射光譜就會(huì)發(fā)生紅移 ，并且熒光強(qiáng)度會(huì)增強(qiáng)，這是一個(gè)很好的用來檢測纖維原形成的測試。 

活性突觸核蛋白 (α-Syn) 聚合體 (SPR-322) 催化活性單體(SPR-321)形成新的聚合體. 

左側(cè)硫黃素 T 發(fā)射光曲線展示了四種試驗(yàn)對象隨時(shí)間增強(qiáng)的熒光強(qiáng)度(相關(guān)于α-Syn 蛋白聚合體),其中 10 nM 活性 α-Syn 聚合體(SPR-322) 與100 μm 活性 α-Syn 單體 (SPR-321) 混合物熒光增強(qiáng)最明顯, 另外幾組對比分別是活性 α-Syn 聚合物 (SPR-322) 、活性 α-Syn 單體 (SPR-321) 以及 Thioflavin T λex = 450 nm, λem = 485 nm. 

細(xì)胞檢測：以下是使用被活性和對照α-突觸核蛋白前體纖維原(PFFs)處理的神經(jīng)元獲取ICC的圖片?；钚驭?突觸核蛋白PFFs處理的原代大鼠海馬體神經(jīng)元顯示了路易體的形成，而經(jīng)對照α-突觸核蛋白處理的神經(jīng)元沒有出現(xiàn)路易體形成。

D-F：被活性小鼠突觸核蛋白聚集體(SPR-324) 4 μg/ml處理后顯示路易體內(nèi)含物（綠色）的形成以及細(xì)胞減少，

A-C：被無活性的對照突觸核蛋白聚集體，處理時(shí)沒有路易體內(nèi)含物形成及細(xì)胞減少.  

組織: 原代海馬體神經(jīng)元(DIV16). 物種: 斯普拉-道來氏大鼠. 固定: 由PFA制作的3% 甲醛固定20分鐘. 阻斷: 1:1 PBS:LiCOR Odyssey Block (LiCOR, 927-40010) 以及 30 mL/mL, 0.1% triton-X 100 阻斷 30 分鐘. 一抗: 小鼠抗pSer129 抗體 (1:1000), 以及兔抗pSer129 (1:800), 4°C下處理24 小時(shí). 二抗: ATTO 546 驢抗小鼠 (1:700) 和 ATTO 488 驢抗兔 (1:700) 室溫下孵育一小時(shí) (復(fù)合圖綠色). 復(fù)染色: Hoechst (藍(lán)色) 細(xì)胞核染色, 1:3000 室溫下孵育1小時(shí). 細(xì)胞定位: 路易體內(nèi)含物. 放大倍數(shù): 20x.

D-F：原代大鼠海馬體神經(jīng)元被活性突觸核蛋白聚集體(SPR-322) 4 μg/ml處理后顯示路易體內(nèi)含物（綠色）的形成

A-C：被對照突觸核蛋白聚集體(SPR-317) 4 μg/ml處理時(shí)沒有路易體內(nèi)含物形成. 

組織: 原代海馬體神經(jīng)元. 物種: 斯普拉-道來氏大鼠. 固定: 由PFA制作的4% 甲醛. 一抗: 小鼠抗pSer129 抗體, 稀釋度 1:1000, 4°C下處理24 小時(shí). 二抗: FITC 羊抗小鼠 (綠色) 稀釋度 1:700室溫下孵育1小時(shí). 復(fù)染色: Hoechst (藍(lán)色) 細(xì)胞核染色, 1:4000 室溫下孵育1小時(shí). 細(xì)胞定位: 路易體內(nèi)含物. 放大倍數(shù): 20x. 

為了滿足不同客戶的研究需求，艾美捷科技為您推薦細(xì)胞應(yīng)激領(lǐng)域StressMarq研發(fā)的，針對α-突觸核蛋白單體、聚集體及多應(yīng)用，多種屬相關(guān)抗體：

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廠家內(nèi)部質(zhì)檢：

StressMarq Biosciences Inc. 在2007年成立于加拿大維多利亞，是一家生物科技公司，專門從事試劑與試劑盒研究，服務(wù)范圍遍及全球50多個(gè)國家。