染色體DNA原位雜交可用來確定外源基因在染色體上的整合位置,對研究外源基因遺傳特性有重要意義。許多實驗表明位置效應是影響外源基因穩(wěn)定及表達的重要因素。 mRNA原位雜交可直觀地觀察到外源mRNA的表達量及不同發(fā)育時期表達有否差異。外源基因表達蛋白的組織細胞免疫定位可用來確定表達蛋白在轉基因植物組織及細胞中的分布,成為研究轉基因植物中外源基因功能及外源蛋白穩(wěn)定性的重要手段。...
3? 轉基因植株外源基因表達情況的檢測與鑒定盡管在mRNA水平也能一定程度地研究外源基因的表達,但存在mRNA在細胞質(zhì)中被特異性地降解等情況,mRNA與表達蛋白質(zhì)的相關性不高(相關系數(shù)低于0.5),基因表達的中間產(chǎn)物mRNA水平的研究并不能取代基因最終表達產(chǎn)物的研究。轉基因植株外源基因表達的產(chǎn)物一般為蛋白,外源基因編碼蛋白在轉基因植物中能夠正常表達并表現(xiàn)出應有的功能才是植物基因轉化的最終目的。...
2.2轉基因植物中35S啟動子的生物安全性 啟動子是基因表達所必需的,它決定了外源基因表達的空間、時間和表達的強度等,是人們定向改造生物的重要限制因素。植物遺傳轉化中最常用的組成型啟動子是35S啟動子。...
除了在商業(yè)領域內(nèi)獲得抗性植株外,植物轉基因技術還延伸到植物生理學研究(生化反應途徑、植物抗病、抗逆性)以及生物反應器研究(藥物、疫苗等)中( Khachatourians 2002 )。一般經(jīng)過上游表達載體的設計構建以及下游轉化體系的建立、轉化品系的篩選鑒定等一系列步驟后,即獲得 T 0 代轉基因植物。在轉化過程中,外源 DNA 隨機插入植物基因組內(nèi),插入的拷貝數(shù)和位點都不固定。...
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