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1. 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

       靶向代謝組學(xué)，針對(duì)特定某一物質(zhì)或某一類代謝物進(jìn)行檢測(cè)的代謝組學(xué)方法，以標(biāo)準(zhǔn)品為參照，利用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)技術(shù)對(duì)目標(biāo)代謝物進(jìn)行準(zhǔn)確的定性定量分析。相對(duì)于全代謝組分析，靶向代謝組學(xué)具有特異性強(qiáng)，靈敏度高和定量準(zhǔn)確等特點(diǎn)。

　　MRM技術(shù)原理：MRM技術(shù)是基于三重四極桿質(zhì)譜原理，第一重四極桿首先篩選目標(biāo)物質(zhì)的前體離子(母離子)，排除掉其他分子量物質(zhì)對(duì)應(yīng)的離子以初步排除干擾;前體離子經(jīng)碰撞室誘導(dǎo)電離后斷裂形成很多碎片離子，碎片離子再通過三重四極桿過濾選擇出所需要的一個(gè)特征碎片離子，排除非目標(biāo)離子干擾，使定量更為精確，重復(fù)性更好。

　   質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)示意圖

　　用戶提供一組給定的代謝物列表，比如某一條或者某幾條代謝通路的代謝物，我公司將根據(jù)這些化合物進(jìn)行定性定量研究。

　　2. 技術(shù)特點(diǎn)

　　◆ 儀器平臺(tái)：AB Sciex QTRAP? 6500 LC-MS/MS

　　◆ 樣本要求：建議量>1g，最少量>0.3g，3份及以上生物學(xué)重復(fù)。

　　◆ 項(xiàng)目周期：具體根據(jù)項(xiàng)目情況而定，一般45自然日。

　　◆ 三大質(zhì)控：

　　(1)空白：清除儀器中殘留雜質(zhì)，提供一個(gè)穩(wěn)定的檢測(cè)環(huán)境，同時(shí)也是對(duì)儀器穩(wěn)定性的監(jiān)控。

　　(2)混標(biāo)：混標(biāo)主要是監(jiān)控儀器的穩(wěn)定性。

　　(3)隨機(jī)樣本重復(fù)：監(jiān)控整個(gè)提取過程的穩(wěn)定性。

　　3.技術(shù)路線

　　4. 樣品要求

　　1.樣品類型

　　a.細(xì)胞，取樣后離心，去除培養(yǎng)基，立即放入液氮中，之后-80°保存;

　　b.葉片、莖、花等，取下后立即放入液氮中，之后-80°保存;

　　c.果實(shí)的果肉、果皮等，如果野外現(xiàn)場(chǎng)不具備分離條件，需盡快(30 min內(nèi))轉(zhuǎn)移至室內(nèi)，分離樣品放入液氮中，之后-80°保存。

　　2.混合取樣

　　每份樣品混合來自至少3株以上的組織。以水稻葉片為例：取同一時(shí)期，表型基本一致的同一個(gè)部位的1片葉片，同時(shí)取6株，放到鉆孔的10ml離心管中，并迅速放入液氮中。

　　3.樣品重量和重復(fù)

　　新鮮的、干凈的植物樣品(鮮樣)，樣本建議量>1g，最少量>0.6g。

　　準(zhǔn)備3份及以上生物學(xué)重復(fù)。

　　4.儲(chǔ)存和運(yùn)輸

　　干冰運(yùn)輸(以3-4公斤干冰揮發(fā)一天計(jì)算，請(qǐng)使用足量的干冰運(yùn)輸)。

　　5.FAQ

　　1. 做靶向是否需要提供標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)準(zhǔn)品的規(guī)格要求

　　靶向項(xiàng)目都需要客戶提供標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)準(zhǔn)品的純度要求大于90%，規(guī)格大于1mg。

　　2. 哪些物質(zhì)適合我們開發(fā)?

　　物質(zhì)沸點(diǎn)高不易揮發(fā)、受熱不穩(wěn)定和分子量大(200—1000Da)的有機(jī)化合物，如甜菜紅素、硒代蛋氨酸、L-硒代胱氨酸、熊果苷等。

　　3. 開發(fā)流程。

　　客戶提供物質(zhì)咨詢單，我們?cè)u(píng)估開發(fā)難度。標(biāo)準(zhǔn)品開發(fā)時(shí)挑選2-3個(gè)離子對(duì)，然后在生物學(xué)樣本中利用開發(fā)離子對(duì)檢測(cè)并采集EPI和標(biāo)準(zhǔn)品的EPI進(jìn)行核對(duì)，挑選響應(yīng)度高的離子對(duì)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量。

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