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Flash快速色譜法的純化理論和選型指導(dǎo)
Flash快速色譜法是一種純化技術(shù)，通過增加壓力推動(dòng)溶劑帶移動(dòng)進(jìn)行快速分離，代替古老的緩慢的低效的重力作用色譜法。與傳統(tǒng)玻璃色譜柱技術(shù)的不同之處在于使用稍小的硅膠顆粒和50–200 psi的壓力?？焖偕V柱通常是預(yù)裝的塑料柱，硅膠粒徑在40–60 mm之間。自動(dòng)快速色譜純化系統(tǒng)由液相色譜系統(tǒng)中常見的部件組成，例如梯度泵、進(jìn)樣口、UV檢測(cè)器和收集洗脫液的餾分收集器。
艾杰爾全新自動(dòng)化純化色譜系統(tǒng)
40多年前，Clark Still最早報(bào)道了快速色譜法，但開發(fā)仍處于起步階段，因?yàn)樾掳l(fā)現(xiàn)的方法很費(fèi)力，并且存在玻璃柱破碎的風(fēng)險(xiǎn)。然而，到1994年，一次性塑料小柱減少了制備過程，提高了重現(xiàn)性并縮短了分離時(shí)間。
老式玻璃柱
艾杰爾Claricep系列Flash柱
快速色譜法廣泛用于分離密切相關(guān)的有機(jī)化合物。在制藥行業(yè)，可用于純化各種多肽、抗生素和相關(guān)藥物中間體，用于藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)。它還可用于分離天然產(chǎn)物，如生育酚、生物堿、黃酮和大麻素。
市場(chǎng)規(guī)模和增長(zhǎng)估計(jì)來(lái)自TDA的行業(yè)數(shù)據(jù)，這是一個(gè)技術(shù)市場(chǎng)概況和基準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)，涵蓋實(shí)驗(yàn)室和過程分析儀器。
2019年，快速色譜的總市場(chǎng)約為1.5億美元。在過去十年中，生物制藥市場(chǎng)逐漸擴(kuò)大了其使用范圍，占需求的四分之三以上。Flash柱預(yù)計(jì)將實(shí)現(xiàn)穩(wěn)健增長(zhǎng)，并且Flash儀器系統(tǒng)的需求預(yù)計(jì)將更強(qiáng)勁。用戶繼續(xù)青睞與先進(jìn)檢測(cè)器結(jié)合使用的Flash儀器，例如蒸發(fā)光散射檢測(cè)器 (ELSD) 。
在Flash純化產(chǎn)品領(lǐng)域，艾杰爾Claricep系列可提供應(yīng)用于各種純化領(lǐng)域的無(wú)定形硅膠基質(zhì)和球形硅膠基質(zhì)兩種類型Flash手?jǐn)Q純化柱，并運(yùn)用獨(dú)特的裝填技術(shù)在保證柱效的同時(shí)也保證了實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性。外殼運(yùn)用聚丙烯，保證對(duì)各類溶劑的兼容性，具有耐壓高、柱效高、耐腐蝕等特點(diǎn)。
某醫(yī)藥中間體
純化前分析譜圖：
色譜柱：Innoval ODS-2 ?5μm 100?? 4.6×250mm（PN：IX952505-2）
流動(dòng)相：A：水（0.05% TFA）
? ? ? ? ? ? B：乙腈（0.05% TFA）
流速：1mL/min
波長(zhǎng)：204nm
Time
B%0802090
采用Flash快速純化富集：
儀器：Cheetah Ⅱ中壓制備系統(tǒng)（PN: CH-200PII）
色譜柱：Flash C18 20-35μm 100? 4g 三支串聯(lián)
流動(dòng)相：A：水：乙腈=50:50
? ? ? ? ? ? B：水：乙腈=20:80
流速：15mL/min
波長(zhǎng)：254nm, 280nm
進(jìn)樣量：105 mg
Time
B%00153016
100
26
100
15.6-16.6min餾分檢測(cè)，滿足純度要求：
某植物油提取物
色譜柱：Luna ?C8(2)? 5μm ? 100??? 4.6×250mm （PN: 00G-4249-E0）
流動(dòng)相：A：水? B：甲醇
流速：1mL/min
波長(zhǎng)：216nm
柱溫：30℃
Time
B%08030
100
Flash純化譜圖：
儀器：Astra中壓制備系統(tǒng)?(PN: AS-204PII)
色譜柱：Flash C18（2）20-35μm 100? 40g和80g串聯(lián)
流動(dòng)相：A：水 ?B：甲醇
流速：40mL/min
波長(zhǎng)：230nm（紅色信號(hào)線）；216nm（藍(lán)色信號(hào)線）
上樣量：250mg油樣品
Time
B%0707093
???+
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