能力驗(yàn)證的作用以及關(guān)于能力驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)建議

安譜實(shí)驗(yàn)

2022.9.22

一、

能力驗(yàn)證的定義

能力驗(yàn)證是指為確定實(shí)驗(yàn)室在特定領(lǐng)域的檢測(cè)/校準(zhǔn)能力而設(shè)計(jì)和運(yùn)作的實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)。它是由認(rèn)可機(jī)構(gòu)或其授權(quán)/認(rèn)可的機(jī)構(gòu)組織和運(yùn)作的。它是確保實(shí)驗(yàn)室維持較高的校準(zhǔn)和檢測(cè)水平而對(duì)其能力進(jìn)行考核、監(jiān)督和確認(rèn)的一種驗(yàn)證活動(dòng)。參加能力驗(yàn)證可以為實(shí)驗(yàn)室提供評(píng)價(jià)其出具數(shù)據(jù)可靠性和有效性的客觀數(shù)據(jù)。

二、

為什么參加能力驗(yàn)證

CNAS-RL02：2018 《能力驗(yàn)證規(guī)則》中對(duì)參加能力驗(yàn)證的要求如下：

從準(zhǔn)則上看，不管是獲得認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室還是初次申請(qǐng)認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室，能力驗(yàn)證都是要主動(dòng)去參加的。其他實(shí)驗(yàn)室也需要根據(jù)自身的發(fā)展規(guī)劃和其他客觀需求選擇參加能力驗(yàn)證。

三、

能力驗(yàn)證的作用

① 能力驗(yàn)證是判定實(shí)驗(yàn)室技術(shù)能力和維持其技術(shù)能力的重要依據(jù)；

② 能力驗(yàn)證為實(shí)驗(yàn)室提供有效的外部質(zhì)量控制，也是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制的重要補(bǔ)充；

③ 能力驗(yàn)證可直接展示實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)能力，提高可信度；

④ 能力驗(yàn)證可一定程度上改善實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理，提高檢測(cè)能力，是實(shí)驗(yàn)室綜合能力的體現(xiàn)，是實(shí)驗(yàn)室間方法和結(jié)果互認(rèn)的基礎(chǔ)。

四、

能力驗(yàn)證的結(jié)果

評(píng)價(jià)參加實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力，常用Z比分?jǐn)?shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。

Z值的絕對(duì)值小于等于2，滿意、通過(guò)；

Z值的絕對(duì)值大于等于3，不滿意、不通過(guò)；

Z值的絕對(duì)值小于3大于2，可疑。

五、

能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的小建議

一些實(shí)驗(yàn)人員往往在參加能力驗(yàn)證時(shí)總是手忙腳亂，擔(dān)心結(jié)果異常，我們以色譜分析類實(shí)驗(yàn)為例，根據(jù)實(shí)驗(yàn)的流程整理了一些小建議，希望可以幫助到參加能力驗(yàn)證的各位老師。

確定檢測(cè)方法

能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目往往有多個(gè)檢測(cè)方法，例如果蔬中毒死蜱的檢測(cè)，就有氣相、氣質(zhì)、氣質(zhì)質(zhì)多個(gè)檢測(cè)方法，能力驗(yàn)證提供機(jī)構(gòu)往往會(huì)推薦相應(yīng)的國(guó)標(biāo)或行標(biāo)方法，建議根據(jù)實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備擴(kuò)項(xiàng)或已具備資質(zhì)的方法，并結(jié)合實(shí)驗(yàn)室具體情況進(jìn)行合理選擇。不建議選擇實(shí)驗(yàn)室自用方法等非標(biāo)方法進(jìn)行能力驗(yàn)證樣品檢測(cè)。

注意樣品保存和使用

能力驗(yàn)證的樣品，例如果蔬汁、肉類凍干粉、中藥粉、土壤等，都會(huì)有一個(gè)合適的儲(chǔ)存條件，收到樣品后需要根據(jù)要求進(jìn)行儲(chǔ)存。特別注意儲(chǔ)存溫度和是否需要干燥儲(chǔ)存。

如果是低溫儲(chǔ)存，在進(jìn)行檢測(cè)實(shí)驗(yàn)前需提前取出樣品恢復(fù)室溫后再進(jìn)行稱量等操作。

稱取樣品前要確保樣品混合均勻，需要使用滿足精密度要求的天平進(jìn)行準(zhǔn)確稱量，并記錄數(shù)據(jù)。

稱樣完成后需要將樣品密封按要求進(jìn)行儲(chǔ)存。

選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)品

根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目，建議選擇兩個(gè)品牌或兩個(gè)批次的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行對(duì)比驗(yàn)證，確保標(biāo)準(zhǔn)曲線的準(zhǔn)確性。注意商品化標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的有效期，如果條件允許，建議能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)使用新的未開(kāi)瓶的標(biāo)準(zhǔn)品制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。

純品型標(biāo)準(zhǔn)品需要使用分析天平進(jìn)行準(zhǔn)確稱量，并記錄數(shù)值，同時(shí)需要關(guān)注標(biāo)準(zhǔn)品的純度，計(jì)算目標(biāo)物濃度時(shí)需要帶入標(biāo)準(zhǔn)品純度。

標(biāo)準(zhǔn)品的選擇還需關(guān)注目標(biāo)物的形式，例如四環(huán)素的標(biāo)準(zhǔn)品是以四環(huán)素鹽酸鹽的形式存在的，需要確認(rèn)最終要求以何種形式進(jìn)行報(bào)告，在進(jìn)行濃度計(jì)算時(shí)需要注意換算。

關(guān)注前處理試劑和耗材

實(shí)驗(yàn)前處理用到的試劑、耗材要保證潔凈度，選擇合適的級(jí)別，避免帶來(lái)污染影響分析，例如氣相氣質(zhì)分析建議選擇農(nóng)殘級(jí)的試劑，液質(zhì)的流動(dòng)相建議選擇LC-MS級(jí)的試劑，塑化劑的實(shí)驗(yàn)建議全程使用玻璃耗材。

關(guān)鍵耗材建議進(jìn)行驗(yàn)收，例如SPE小柱，可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，進(jìn)行小柱回收率和本底的驗(yàn)收，保證滿足實(shí)驗(yàn)需求。

實(shí)驗(yàn)用到的移液器、容量瓶等計(jì)量產(chǎn)品需要關(guān)注是否進(jìn)行校準(zhǔn)，準(zhǔn)確性是否滿足要求。

實(shí)驗(yàn)建議加入方法空白驗(yàn)證前處理的本底情況。如果方法空白有本底或雜峰干擾檢出，建議可進(jìn)行分段排查確定污染來(lái)源，然后進(jìn)行更換或清洗。

樣品預(yù)實(shí)驗(yàn)分析

能力驗(yàn)證樣品通常都是陽(yáng)性樣品，有時(shí)候含量會(huì)超出我們平常使用的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，且樣品質(zhì)量有限，常常不能承受多次的重復(fù)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，因此預(yù)實(shí)驗(yàn)顯得尤為重要。

在樣品量有限的情況下，一般建議可以根據(jù)檢測(cè)方法，將樣品量減半進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)得到樣品中目標(biāo)物的預(yù)估含量，通過(guò)預(yù)估含量確定正式實(shí)驗(yàn)中樣品加標(biāo)水平的選擇，以及標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍的選擇。

加標(biāo)樣品保障實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性

食品中農(nóng)獸殘檢測(cè)等痕量物質(zhì)分析實(shí)驗(yàn)中目標(biāo)物的回收率通常在80-120%左右，因此色譜分析類能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中建議要同時(shí)進(jìn)行加標(biāo)樣品的檢測(cè)，保證前處理操作的正確性。

建議使用待測(cè)的陽(yáng)性樣品做加標(biāo)實(shí)驗(yàn)，而不是使用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的同種類陰性樣品；建議加標(biāo)樣品中添加的目標(biāo)物含量是待測(cè)樣品的0.5-2倍左右，加標(biāo)溶液的使用體積在0.1mL左右；加標(biāo)樣品的平行數(shù)量建議2-3個(gè)。

加標(biāo)樣品如果回收率偏低建議進(jìn)行分段分步排查，通過(guò)不帶基質(zhì)加標(biāo)，小柱柱前加標(biāo)，SPE小柱分步收集等方式排查回收率異常問(wèn)題。

加標(biāo)樣品回收率偏高可以通過(guò)排查人員失誤、方法空白、移液器容量瓶等計(jì)量產(chǎn)品的準(zhǔn)確性、儀器污染和基質(zhì)效應(yīng)等方面來(lái)查找問(wèn)題。

除了做隨行加標(biāo)樣品反饋實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性外，還可以通過(guò)使用合適的質(zhì)控樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，反映實(shí)驗(yàn)整體的正確性。

注意標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距

能力驗(yàn)證的結(jié)果計(jì)算中往往會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線線性很好，樣品加標(biāo)回收率也滿足要求，但是結(jié)果還是會(huì)有偏差的現(xiàn)象。這種情況可能需要檢查下標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距，有可能是因?yàn)榫€性范圍較大或存在本底影響等原因?qū)е陆鼐嗥?，在?jì)算濃度偏低的樣品時(shí)會(huì)有較大影響。因此在標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備和計(jì)算時(shí)不僅要關(guān)注線性相關(guān)系數(shù)R2，還要關(guān)注標(biāo)線的截距，出現(xiàn)截距偏大的情況需要根據(jù)具體情況，進(jìn)行分析判斷，排查原因。

結(jié)果的計(jì)算

能力驗(yàn)證樣品的最終報(bào)告數(shù)據(jù)建議進(jìn)行樣品加標(biāo)回收率的折算，加標(biāo)回收率的計(jì)算需考慮樣品稱樣量，換算到樣品中的含量進(jìn)行計(jì)算。下表是我們實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行中藥中五氯硝基苯能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)時(shí)的結(jié)果計(jì)算表格，僅供各位老師參考。