糖化血紅蛋白(HbA1c)的檢測方法-乳膠凝集反應(yīng)法
乳膠凝集反應(yīng)法是利用糖化血紅蛋白(HbA1c)抗原與HbA1c抗體直接測定總血紅蛋白Hb中的糖化血紅蛋白(HbA1c)的百分含量。目前國內(nèi)外幾家廠商可以提供HbA1c測定的試劑盒。這種免疫反應(yīng)是由被測血樣品種的總Hb和HbA1c與試劑中的HbA1c抗體結(jié)合而形成凝集,凝集量隨HbA1c蛋白濃度的大小而變化。用生物分析儀器來進(jìn)行比濁測定HbA1c抗原的濃度,采用終點(diǎn)法,生化儀通過測定反應(yīng)液的吸光度值,可直接反映出凝集量的多少;推算出HbA1c占Hb的百分含量,測定時,儀器多采用660nm單色光做主波長,800nm單色光做副波長,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得出實(shí)測值。由于這種試驗(yàn)其標(biāo)準(zhǔn)曲線是非線性的,所以在測定前,首先用隨試劑盒一起帶有的5種不同濃度的定標(biāo)液,做出5點(diǎn)非線性標(biāo)準(zhǔn)曲線。曲線和數(shù)值存在生化儀的貯存器中,測定樣品時,實(shí)測出的吸光度值A(chǔ)與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,由儀器CPU求出實(shí)測樣品中的HbA1c百分含量。乳膠凝集反應(yīng)法測定HbA1c方便、不用增加儀器,可直接用自動生化分析對樣品進(jìn)行快速測定。該方法也可以用手工的方法,在酶標(biāo)儀進(jìn)行測定,是目前使用較多的方法。但乳膠凝集反應(yīng)法其準(zhǔn)確性和重復(fù)性均有欠缺。