DNA技術(shù)的發(fā)展歷程
我國法醫(yī)DNA技術(shù)的發(fā)展道路不是很長,但卻取得了突出的成果,在偵查破案中發(fā)揮了巨大的作用。
在“七五”后期,從1987年起,我國正式立項對DNA指紋技術(shù)進(jìn)行研究,經(jīng)過兩年的努力,至1989年我國首次把DNA指紋技術(shù)應(yīng)用于辦案,開始了我國 法醫(yī)DNA檢驗的新時代。隨著DNA指紋技術(shù)的不斷應(yīng)用,技術(shù)人員越來越感到其不能滿足實際工作的需要,存在許多不足之處。
“八五”期間,我國把解決法醫(yī)DNA檢驗存在的疑難問題的研究列入重點攻關(guān)計劃。在DNA指紋技術(shù)的研究中裝備了國產(chǎn)化的多位點探針,建立了用非同位素標(biāo) 記探針的方法檢測DNA指紋技術(shù);在利用PCR技術(shù)進(jìn)行DNA檢驗的研究中建立了檢測DNA擴(kuò)增片段長度多態(tài)性的方法,用于一系列多態(tài)性位點的分析;在解 決毛發(fā)、指甲等特殊檢材的檢驗上,建立了測定人類線粒體DNA序列多態(tài)性的方法。所有這些成果,擴(kuò)大了DNA技術(shù)檢驗各種檢材的能力,更加適合于實際檢材 的需要,尤其是PCR檢驗方法的建立,使得DNA技術(shù)更有生命力,適合于推廣應(yīng)用。
進(jìn)入“九五”期間,我國法醫(yī)DNA檢驗技術(shù)又有了新的發(fā)展,除了對一些疑難檢材如骨骼等的檢驗進(jìn)行研究外,商品化DNA檢驗試劑盒的出現(xiàn),使DNA檢驗技 術(shù)更加規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)化,尤其是STR復(fù)合擴(kuò)增技術(shù)的應(yīng)用使DNA檢驗技術(shù)步入了新的階段。在檢測方法上,也從銀染法人工染色、肉眼觀察分析結(jié)果發(fā)展到熒光法 自動電泳收集、計算機(jī)分析結(jié)果,一次檢驗分析的STR多態(tài)性位點顯著增多,最多的一次檢驗可達(dá)16個位點,大大提高了個體識別率,達(dá)到了同一認(rèn)定的水平。
經(jīng)過十余年的刻苦攻關(guān),法醫(yī)DNA檢驗技術(shù)取得了豐碩的成果,DNA指紋技術(shù)正日趨被淘汰。目前,隨著PCR多態(tài)性系統(tǒng)的大量增多,基于PCR方法進(jìn)行的檢驗在個體識別率上顯著提高,在我國使用DNA指紋進(jìn)行辦案的實驗室也大大減少,該方法在案件鑒定中已基本被淘汰。
STR是存在于人類基因組DNA中的一類具有長度多態(tài)性的DNA序列,其核心序列一般由2~6個堿基構(gòu)成,不同數(shù)目的核心序列呈串聯(lián)重復(fù)排列,而呈現(xiàn)出長 度多態(tài)性。一般認(rèn)為,人類基因組DNA中平均每6~10kb就有一個STR位點,其多態(tài)性成為法醫(yī)物證檢驗個人識別和親子鑒定的豐富來源。與DNA指紋技 術(shù)相比,基于PCR技術(shù)的STR多態(tài)性分型在操作上要簡便得多,在靈敏度上要高得多,在檢驗降解DNA的能力上要強(qiáng)得多,在結(jié)果分析上要標(biāo)準(zhǔn)得多。同時, 由于STR的擴(kuò)增片段較短、擴(kuò)增條件類似,能夠在同一體系中進(jìn)行復(fù)合擴(kuò)增,一次檢驗就獲得較多的多態(tài)性信息。分析STR位點的多態(tài)性是法醫(yī)DNA檢驗技術(shù) 的新突破,目前己成為法醫(yī)學(xué)上個體識別和親子鑒定主要技術(shù)方法。
在檢測方法上,目前國內(nèi)根據(jù)各自實驗室情況的不同,分別采用銀染法和熒光法進(jìn)行STR的分型。近兩年來,熒光法檢測技術(shù)以其快速(一次檢驗僅需數(shù)小時)、 靈敏度高(適合現(xiàn)場提取的微量樣品的檢驗)、檢驗結(jié)果更加準(zhǔn)確(每個泳道內(nèi)都加入內(nèi)標(biāo))、易于標(biāo)準(zhǔn)化和建立數(shù)據(jù)庫等優(yōu)點逐漸代替了銀染法檢測技術(shù),但是使 用熒光自動分析方法對STR位點分型又有所需儀器設(shè)備以及所用消耗試劑昂貴的缺陷。