蛋白質(zhì)電泳制膠要注意哪些方面
總結(jié)平時的實驗經(jīng)驗,大概需要注意以下幾條:
1.玻璃板需要清洗干凈,不然蛋白質(zhì)在凝膠中電泳會受到阻礙.一般用軟布在自來水下清洗后用蒸餾水洗一下,或者直接偷懶的辦法就是拿酒精棉球擦擦.
2.確保制膠所用試劑有效.
3.根據(jù)你的目的蛋白分子量確定膠的濃度.
一般采用如下:
蛋白分子量大?。╧d) 凝膠百分比(10%)
4-40 20
12-45 15
10-70 12.5
15-100 10
25-200 8
4.水封:一定要注意緩慢加入水,不然由于沖的厲害,很容易最后膠不平.好的辦法就是用乙醇封.
5.由于梳子質(zhì)量問題,兩邊的“耳朵”容易斷掉,這樣兩邊的孔容易漏出,建議插梳子以后在梳子的上方再多加一些濃縮膠.
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