藥物檢測技術(shù)--溶出度測定法及注意事項
溶出度是指活性藥物從片劑、膠囊劑或顆粒劑等普通制劑在規(guī)定條件下溶出的速率和程度。在緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑及透皮貼劑等制劑中也稱釋放度。
固體制劑中的藥物只有溶解之后,才能被機體吸收,而崩解只是藥物溶出的最初階段,還不能客觀反映藥物在體內(nèi)溶出的全過程。藥物在體內(nèi)吸收的速度通常由溶解的快慢而決定。因此,溶出度是評價固體制劑內(nèi)在質(zhì)量的重要指標(biāo)之一,是觀察生物利用度的一種體外試驗法。
《中華人民共和國藥典》(2015年版)收載5種測定方法:轉(zhuǎn)籃法、漿法、小杯法、槳碟法、轉(zhuǎn)筒法。溶出度測定法的基本原理是將某種固體制劑的一定量分別置于溶出度儀的轉(zhuǎn)籃(或燒杯)中,在37.0℃±0.5℃恒溫下,在規(guī)定的轉(zhuǎn)速,介質(zhì)中依法檢查,在規(guī)定的時間測定其溶出的量。
2.儀器裝置
溶出度儀由同步電動機、恒溫循環(huán)水浴箱溶出系統(tǒng)(溶出杯、攪拌裝置、溶出介質(zhì))、計時裝置、加熱器、取樣裝置等部件組成?！吨腥A人民共和國藥典》對不同測試方法中溶出度儀的重要的部件的形狀與尺寸做出了具體的規(guī)定。
3.操作方法
(1)第一法(轉(zhuǎn)籃法)
測定前,應(yīng)對儀器裝置進(jìn)行必要的調(diào)試,使轉(zhuǎn)籃底部距溶出杯的內(nèi)底部(25±2)mm。分別量取經(jīng)脫氣處理的溶出介質(zhì),注入每個溶出杯中,加溫使溶出介質(zhì)溫度保持在37.0℃±0.5℃,取供試品6片(粒、袋),分別投入6個干燥的轉(zhuǎn)籃內(nèi),按照各品種項下的規(guī)定調(diào)節(jié)電動機轉(zhuǎn)速,待其平穩(wěn)后,將轉(zhuǎn)籃降入容器中,自供試品接觸溶出介質(zhì)起立即開始計時;至定的取樣時間(緩控釋制劑至少采用三個取樣點),取樣位置應(yīng)在轉(zhuǎn)籃頂端至液面的中點,距溶出杯內(nèi)壁不小于10mm處,吸取溶液適量,立即經(jīng)適當(dāng)微孔濾膜濾過,自取樣至濾過應(yīng)在30s內(nèi)完成。取澄清濾液照該品種項下規(guī)定的方法測定,計算出每片(粒、袋)的溶出量。
(2)第二法(槳法)
用攪拌槳代替轉(zhuǎn)籃,供試品放在容器中,測定方法與轉(zhuǎn)籃法相同。除另有規(guī)定外,片劑或膠囊劑浮于液面,應(yīng)先將其裝入沉降籃內(nèi),在沉入溶出杯中時進(jìn)行測試。取樣位置應(yīng)在槳葉頂端至液面的中點,距溶出杯內(nèi)壁不小于10mm處。
腸溶制劑:
方法一
①酸中溶出量:除另有規(guī)定外,量取0.1mol/L HCl溶液750ml,注入每個容器,加溫使溶液溫度保持在(37.0±0.5)℃,取6片(粒)分別投入轉(zhuǎn)籃或容器中,按各藥品項下規(guī)定的轉(zhuǎn)速啟動儀器,運轉(zhuǎn)2h后,在規(guī)定取樣點吸取溶液適量,立即濾過,自取樣至濾過應(yīng)在30s內(nèi)完成,濾液按各藥品項下規(guī)定的方法測定,計算每片(粒)酸中溶出量。
②緩沖液中溶出量:上述酸液中加入0.2mol/L磷酸鈉溶液250ml(必要時用2mol/L HCl溶液或2mol/L?NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8),繼續(xù)運轉(zhuǎn)45min,或按各藥品項下規(guī)定的時間,在規(guī)定取樣點吸取溶液適量,立即濾過,自取樣至濾過應(yīng)在30s內(nèi)完成,按各藥品項下規(guī)定的方法測定,算出每片(粒)的緩沖液中溶出量。
方法二
①酸中溶出量:除另有規(guī)定外,量取0.1mol/L HCl溶液900ml,注入每個容器,按照方法一酸中溶出量測定方法進(jìn)行測定。
②緩沖液中溶出量:棄去上述各容器中酸液,立即加入磷酸鹽緩沖液(取0.1mol/L HCl溶液和0.2mol/LNa3PO4溶液,按3:1混合均勻,必要時用2mol/L HCl溶液或2mol/L?NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8)900ml,或?qū)⒚科?粒)轉(zhuǎn)移入另1個盛有磷酸鹽緩沖液(pH值6.8)900ml的容器中,按照方法一緩沖液中溶出量項進(jìn)行測定。
(3)第三法(小杯法)
本法容器為250ml、內(nèi)徑為(62±3)mm、高為(126±6)mm的溶出杯。其余要求同轉(zhuǎn)籃法。操作同槳法。本法適用于含量較低的片劑的溶出度測定。測定前,應(yīng)對儀器設(shè)置進(jìn)行必要的調(diào)試,使槳葉底部距溶出杯的內(nèi)底部15mm±2mm。除有規(guī)定外,量取經(jīng)脫氣處理的溶劑100～250ml注入每個操作容器內(nèi)(用于膠囊劑測定時,如膠囊上浮,可用一小段耐腐蝕的細(xì)金屬絲輕繞于膠囊外殼)。取樣位置應(yīng)在槳葉頂端至液面的中點,距溶出杯內(nèi)壁6mm處。以下操作同槳法。
第二法、第三法用于膠囊劑測定時,如膠囊上浮,可用一小段耐腐蝕的金屬線輕繞于膠,或?qū)⒛z囊裝入耐腐蝕的金屬沉降籃內(nèi)。
(4)第四法(槳碟法)
方法一攪拌槳、溶出杯按照第二法,但另用網(wǎng)碟組成其槳碟裝置。
方法二除將方法一的網(wǎng)碟換成其他類型的網(wǎng)碟外,其他裝置和要求與方法一相同。
透皮貼劑? ?分別量取溶出介質(zhì)置各溶出杯內(nèi),待釋放溶出介質(zhì)預(yù)溫至32.0℃±0.5℃,將透皮貼劑固定于兩層碟片之間(方法一)或網(wǎng)碟上(方法二),溶出面朝上,盡可能使其保持平整。再將網(wǎng)碟水平放置于溶出杯下部,并使貼劑與槳底旋轉(zhuǎn)面平行,兩者相距25mm±2mm,按品種正文規(guī)定的轉(zhuǎn)速啟動裝置。在規(guī)定取樣時間點,吸取溶液適量,及時補充相同體積的溫度為32.0℃±0.5℃的空白釋放溶出介質(zhì)。取樣位置應(yīng)在槳葉頂端至液面的中點,距溶出杯內(nèi)壁10mm處。
(5)第五法(轉(zhuǎn)筒法)
溶出杯按槳法,但攪拌槳另用不銹鋼轉(zhuǎn)筒裝置替代。組成攪拌裝置的桿和轉(zhuǎn)筒均由不銹鋼焊接而成,應(yīng)不影響被測物質(zhì)的測定。
透皮貼劑? ?分別量取釋放溶出介質(zhì)置各溶出杯內(nèi),待釋放溶出介質(zhì)預(yù)溫至32.0℃±0.5℃,除另有規(guī)定外,按下述進(jìn)行準(zhǔn)備:除去貼劑的保護套,將有黏性的一面置于一片銅紡上,銅紡的邊比貼劑的邊至少大1cm。將貼劑的銅紡覆蓋面朝下放置于干凈的表面,涂布適宜的黏合劑于多余的銅紡邊。如需要將黏附劑涂布于貼劑背面。干燥1min,仔細(xì)將貼劑涂有黏合劑的面安裝于轉(zhuǎn)筒外部,使貼劑的長軸通過轉(zhuǎn)筒的圓心。擠壓銅紡面除去引入的氣泡。將轉(zhuǎn)筒安裝在儀器中,試驗過程中保持轉(zhuǎn)筒底部距溶出杯內(nèi)底部25mm±2mm,立即按品種正文規(guī)定的轉(zhuǎn)速啟動儀器。在規(guī)定取樣時間點,吸取溶液適量,及時補充相同體積的溫度為32.0℃±0.5℃的空白釋放溶出介質(zhì)取樣位置在介質(zhì)液面與轉(zhuǎn)筒頂部的中間位置,距溶出杯內(nèi)壁10mm處。同法測定其他透皮貼劑。
4.結(jié)果判斷
取供試品6片(粒、袋),測定每片(個)的溶出量,按標(biāo)示含量計算,進(jìn)行判斷。除另有規(guī)定外,應(yīng)符合下列規(guī)定。
5.注意事項
(1)為使同一種藥物的溶出度測定得到良好的再現(xiàn)性,應(yīng)對新安裝的溶出度儀采用溶出度校正片進(jìn)行校正,對已使用過的儀器也應(yīng)定期進(jìn)行校正。
(2)第一法在轉(zhuǎn)籃降入溶劑時,立即開始計時;第二法、第三法在供試品接觸液面時,立即開始計時。
(3)達(dá)到規(guī)定溶出時間時,應(yīng)在儀器開動的情況下取樣,實際取樣時間與規(guī)定時間的差異不得超過±2%;自6杯中完成取樣應(yīng)在1min內(nèi)。
(4)水浴中的水應(yīng)保持清潔,定期更換;水浴液面應(yīng)高于圓底燒杯內(nèi)溶劑的液面。
(5)溶出介質(zhì)中溶解氧會影響藥物釋放速度,特別是第一法,氣泡會堵塞轉(zhuǎn)籃孔,造成溶出率降低。應(yīng)新鮮配制和經(jīng)脫氣處理,預(yù)熱后加入溶出杯中,并加有機玻璃蓋,保持每個圓底燒杯內(nèi)溶劑的溫度為(37.0±0.5)℃;如果溶出介質(zhì)為緩沖液,當(dāng)需要調(diào)節(jié)pH值時,一般調(diào)節(jié)pH值至規(guī)定pH值±0.05之內(nèi)。
(6)溶出介質(zhì)實際量取體積與規(guī)定體積的偏差應(yīng)不超過±1%。
(7)如膠囊殼對分析有干擾,應(yīng)取不少于粒膠囊,除盡內(nèi)容物后,置一個溶出杯內(nèi),按該品種項下規(guī)定的分析方法測定每個空膠囊的空白值,做必要的校正。如校正值大于標(biāo)示量的25%,試驗無效。如校正值不大于標(biāo)示量的2%,可忽略不計。
(8)實驗結(jié)束后,應(yīng)將籃軸、籃體或攪拌槳從電機上取下,用蒸餾水沖洗,晾干后妥善保存,避免轉(zhuǎn)軸變形。
