蛋白質(zhì)分離純化設(shè)備的蛋白質(zhì)的分離純化方法介紹
一、沉淀法
沉淀法也稱溶解度法。其純化生命大分子物質(zhì)的基本原理是根據(jù)各種物質(zhì)的結(jié)構(gòu)差異性來(lái)改變?nèi)芤旱哪承┬再|(zhì)，進(jìn)而導(dǎo)致有效成分的溶解度發(fā)生變化。
1、鹽析法
鹽析法的根據(jù)是蛋白質(zhì)在稀鹽溶液中，溶解度會(huì)隨鹽濃度的增高而上升，但當(dāng)鹽濃度增高到一定數(shù)值時(shí)，使水活度降低，進(jìn)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，最終引起蛋白質(zhì)分子間互相凝聚并從溶液中析出。
2、有機(jī)溶劑沉淀法
有機(jī)溶劑能降低蛋白質(zhì)溶解度的原因有二：其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用；其二、有機(jī)溶劑的介電常數(shù)比水小，導(dǎo)致溶劑的極性減小。
3、蛋白質(zhì)沉淀劑
蛋白質(zhì)沉淀劑僅對(duì)一類或一種蛋白質(zhì)沉淀起作用，常見(jiàn)的有堿性蛋白質(zhì)、凝集素和重金屬等。
4、聚乙二醇沉淀作用
聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀作用。
5、選擇性沉淀法
根據(jù)各種蛋白質(zhì)在不同物理化學(xué)因子作用下穩(wěn)定性不同的特點(diǎn)，用適當(dāng)?shù)倪x擇性沉淀法，即可使雜蛋白變性沉淀，而欲分離的有效成分則存在于溶液中，從而達(dá)到純化有效成分的目的。
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