2020版《中國藥典》三部--人用重組DNA蛋白制品總論
1 概述
人用重組DNA蛋白制品是采用重組DNA技術(shù)，對編碼所需蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行遺傳修飾，利用質(zhì)粒或病毒載體將目的基因?qū)脒m當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞，表達(dá)并翻譯成蛋白質(zhì)，經(jīng)過提取和純化等步驟制備而成的具有生物學(xué)活性的蛋白質(zhì)制品，用于疾病的預(yù)防和治療。
本總論是對治療用人用重組DNA蛋白制品生產(chǎn)和質(zhì)量控制的通用性技術(shù)要求，具體品種還應(yīng)符合本版藥典各論的要求。
2 制造
2.1 基本要求
人用重組DNA蛋白制品的制造主要包括工程細(xì)胞的制備、發(fā)酵或細(xì)胞培養(yǎng)，目的蛋白質(zhì)的提取和純化、制劑等過程。工程細(xì)胞的來源、管理及檢定應(yīng)符合“生物制品生產(chǎn)檢定用菌毒種管理及質(zhì)量控制”和“生物制品生產(chǎn)檢定用動物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制”的相關(guān)要求。生產(chǎn)過程中使用的原材料和輔料應(yīng)符合相關(guān)要求。應(yīng)采用經(jīng)過驗(yàn)證的生產(chǎn)工藝進(jìn)行生產(chǎn)，并對生產(chǎn)工藝全過程進(jìn)行控制。
2.2 工程細(xì)胞的控制
應(yīng)建立細(xì)胞種子、主細(xì)胞庫及工作細(xì)胞庫。一般情況下主細(xì)胞庫來自細(xì)胞種子，工作細(xì)胞庫來自主細(xì)胞庫。主細(xì)胞庫和工作細(xì)胞庫均應(yīng)有詳細(xì)的制備過程、檢定情況及管理規(guī)定，并應(yīng)符合“生物制品生產(chǎn)檢定用動物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制”的相關(guān)要求。
2.2.1 表達(dá)載體和宿主細(xì)胞
應(yīng)描述宿主細(xì)胞和表達(dá)載體的起源、來源、遺傳背景，包括克隆基因的來源和特性、構(gòu)建和鑒別情況，以及表達(dá)載體遺傳特性和結(jié)構(gòu)等詳細(xì)資料，同時(shí)應(yīng)說明表達(dá)載體來源和各部分的功能。
應(yīng)詳細(xì)描述表達(dá)載體擴(kuò)增、對宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)化方法、生產(chǎn)用細(xì)胞克隆的篩選標(biāo)準(zhǔn)及其在宿主細(xì)胞中的位置、物理狀態(tài)和遺傳穩(wěn)定性資料。應(yīng)明確克隆基因、表達(dá)載體控制區(qū)及其兩側(cè)、與表達(dá)或產(chǎn)品質(zhì)量相關(guān)的核苷酸序列，以及在生產(chǎn)過程中控制、提高表達(dá)水平的各種措施。
2.2.2 細(xì)胞庫系統(tǒng)
通常包括主細(xì)胞庫和工作細(xì)胞庫。主細(xì)胞庫是由含目的基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)化的細(xì)胞種子經(jīng)傳代擴(kuò)增制成的均一懸液，分裝于單獨(dú)容器中用于貯存。工作細(xì)胞庫是從主細(xì)胞庫經(jīng)有限傳代擴(kuò)增制成的均一懸液，并分裝于單獨(dú)容器中用于貯存。所有的貯藏容器應(yīng)在相同條件下妥善保管，一旦取出使用，不得再返回庫內(nèi)保存。
應(yīng)詳細(xì)記錄細(xì)胞庫類型、容量、預(yù)期使用頻率下的壽命、保存容器、凍存劑、培養(yǎng)基、冷凍保存步驟和貯存條件等信息，并提供庫存細(xì)胞穩(wěn)定性的證據(jù)。
2.2.3 細(xì)胞庫的質(zhì)量控制
應(yīng)對主細(xì)胞庫的表型和基因型標(biāo)記進(jìn)行鑒定。應(yīng)采用分子生物學(xué)或其他適合的技術(shù)對表達(dá)載體基因拷貝數(shù)、基因插入或缺失、整合位點(diǎn)數(shù)量等情況進(jìn)行分析。核苷酸序列應(yīng)與表達(dá)載體一致，并與所預(yù)期的表達(dá)蛋白質(zhì)的序列吻合。
應(yīng)對細(xì)胞庫進(jìn)行支原體、外源病毒因子等相關(guān)微生物污染的檢測，并確認(rèn)細(xì)胞基質(zhì)沒有被污染。已知攜帶內(nèi)源逆轉(zhuǎn)錄病毒的嚙齒類細(xì)胞株，如CHO細(xì)胞等，已廣泛用于生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)采取風(fēng)險(xiǎn)控制策略，在工藝中采用物理、化學(xué)等手段對其進(jìn)行去除/滅活。
主細(xì)胞庫應(yīng)進(jìn)行全面檢定，并符合要求；工作細(xì)胞庫可根據(jù)主細(xì)胞庫的檢定情況確定應(yīng)檢定的項(xiàng)目，并符合要求。
2.2.4 細(xì)胞基質(zhì)的遺傳穩(wěn)定性
應(yīng)評估細(xì)胞基質(zhì)的穩(wěn)定性。應(yīng)基于宿主細(xì)胞經(jīng)長時(shí)間培養(yǎng)后表達(dá)產(chǎn)物分子的完整性，以及細(xì)胞基質(zhì)表型和基因型特征的綜合情況，確定生產(chǎn)用細(xì)胞的最高限定代次。
長期發(fā)酵的多次收獲物會導(dǎo)致一些質(zhì)量屬性的漂移，例如糖基化等。出現(xiàn)的“新”的變體可能會影響制品的質(zhì)量、安全和有效性。這類漂移應(yīng)在工藝驗(yàn)證的研究中充分鑒定并明確控制策略。
2.3 生產(chǎn)過程的控制
生產(chǎn)工藝應(yīng)穩(wěn)定可控，并有明確的過程控制參數(shù)，以確保制品安全有效、質(zhì)量可控。生產(chǎn)工藝的確定應(yīng)建立在對目標(biāo)制品的質(zhì)量屬性、生產(chǎn)工藝的深入理解和全面設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)上。應(yīng)根據(jù)研發(fā)早期到規(guī)?；a(chǎn)的整個(gè)工藝周期的相關(guān)信息，確定原液和成品生產(chǎn)的關(guān)鍵步驟并制定可接受標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行控制，同時(shí)對其他確保工藝一致性的環(huán)節(jié)進(jìn)行控制。適當(dāng)?shù)墓に囘^程控制能夠減少對原液和（或）成品常規(guī)檢測的需求。
2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
應(yīng)對生產(chǎn)過程中使用的各種原材料進(jìn)行質(zhì)量控制，以保證這些原材料符合既定用途質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求。
2.3.1.1 有限傳代水平的生產(chǎn)
應(yīng)限定生產(chǎn)過程中表達(dá)載體細(xì)菌或細(xì)胞傳代（或細(xì)胞群體倍增）的最高次數(shù)，最高限定代次的確定應(yīng)基于細(xì)胞表型、基因型特性及其所表達(dá)基因的分子完整性、一致性，以及生產(chǎn)末期宿主細(xì)胞/載體的一致性研究，如質(zhì)粒拷貝數(shù)及其在宿主細(xì)胞內(nèi)的狀態(tài)，證明上述特征的試驗(yàn)所涉及的傳代范圍應(yīng)等于或超過規(guī)定的細(xì)胞最高限定代次。
應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)過程中培養(yǎng)、增殖和表達(dá)量一致性的研究資料，確定終止培養(yǎng)、廢棄培養(yǎng)物以及摒棄收獲物的技術(shù)參數(shù)。
2.3.1.2 連續(xù)培養(yǎng)生產(chǎn)
采用細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)生產(chǎn)時(shí)應(yīng)根據(jù)系統(tǒng)特點(diǎn)和穩(wěn)定性以及培養(yǎng)期間產(chǎn)品一致性的研究資料，確定連續(xù)培養(yǎng)的最長周期以及培養(yǎng)周期全過程的監(jiān)測要求，包括生產(chǎn)過程中制品變異體或其他培養(yǎng)參數(shù)未超過標(biāo)準(zhǔn)限度的數(shù)據(jù)。應(yīng)對收獲階段的微生物污染進(jìn)行常規(guī)檢測，收獲物后續(xù)加工中批次的確定應(yīng)清晰并易于追溯。
應(yīng)根據(jù)宿主載體系統(tǒng)的穩(wěn)定性和制品特性等確定對細(xì)胞、制品進(jìn)行再評估的時(shí)間間隔。
2.3.2 提取和純化
制品的提取、純化主要依賴于各種蛋白質(zhì)分離技術(shù)。采用的分離純化方法或技術(shù)，應(yīng)能適用于規(guī)?；a(chǎn)并保持穩(wěn)定。應(yīng)對純化工藝中可能殘存的有害物質(zhì)進(jìn)行嚴(yán)格檢測，這些組分包括固定相或者流動相中的化學(xué)試劑、各類親和色譜柱的脫落抗體或配基以及可能對目標(biāo)制品關(guān)鍵質(zhì)量屬性造成影響的各種物質(zhì)等。
采用細(xì)胞培養(yǎng)或酵母等真核表達(dá)系統(tǒng)時(shí)，其蛋白質(zhì)產(chǎn)物多為分泌性蛋白質(zhì)，通常只需去除細(xì)胞或酵母即可初步獲得較高純度的目的蛋白；采用大腸埃希菌等原核表達(dá)系統(tǒng)時(shí)，菌體裂解后應(yīng)盡快進(jìn)行蛋白質(zhì)純化。
純化工藝應(yīng)保證對制品中的一些特定工藝雜質(zhì)，包括來自表達(dá)載體的核酸、宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)、病毒等外源因子污染，細(xì)菌內(nèi)毒素以及源自培養(yǎng)液的各種其他殘留物，必要時(shí)可采用特定的工藝將其去除或降低至可接受的水平。
生產(chǎn)工藝的優(yōu)化應(yīng)考慮殘留宿主DNA片段的大小、殘留量和對生物活性的影響。應(yīng)采用適宜的方式將殘留宿主DNA總量降至可接受的水平，并就降低殘留宿主DNA片段的大小或者滅活DNA活性的方式進(jìn)行說明。
對于人和動物源的細(xì)胞基質(zhì)，病毒去除/滅活工藝均應(yīng)充分顯示能去除/滅活任何可能污染的病毒，確保原液的安全性。滅活工藝應(yīng)經(jīng)驗(yàn)證并符合要求。
2.3.3 原液
收獲液經(jīng)提取、純化分裝于中間貯存容器中即為原液。如需加入穩(wěn)定劑或賦形劑，應(yīng)不影響質(zhì)量檢定，否則應(yīng)在添加輔料前取樣進(jìn)行原液檢定。原液的檢測項(xiàng)目取決于工藝的驗(yàn)證、一致性的確認(rèn)和預(yù)期產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)與工藝相關(guān)雜質(zhì)的水平。應(yīng)采用適當(dāng)方法對原液質(zhì)量進(jìn)行檢測，必要時(shí)應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比較。原液貯存應(yīng)通過穩(wěn)定性驗(yàn)證確定貯存條件和時(shí)間。
2.3.4 半成品
可由一批或多批原液合并生產(chǎn)半成品。擬混合的每批原液應(yīng)在有效期內(nèi)且應(yīng)符合擬制備制劑的有效期要求，每批原液應(yīng)按規(guī)定的工藝生產(chǎn)、單獨(dú)檢驗(yàn)，并符合相應(yīng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；不得將不合格批次與其他合格批次原液進(jìn)行混合制備半成品；混合的各批原液應(yīng)可有效追溯；應(yīng)對混合工藝進(jìn)行驗(yàn)證。
除另有規(guī)定外，制備成品前，如需對原液進(jìn)行稀釋或加入其他輔料制成半成品，應(yīng)確定半成品的質(zhì)量控制要求，包括檢定項(xiàng)目和可接受的標(biāo)準(zhǔn)。
2.3.5 成品制劑
制劑生產(chǎn)應(yīng)符合本版藥典和中國現(xiàn)行《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的相關(guān)要求。
2.4 生產(chǎn)工藝變更
生產(chǎn)工藝變更應(yīng)符合國家藥品注冊管理等相關(guān)要求。涉及重大生產(chǎn)工藝的變更，應(yīng)對變更前后的制品質(zhì)量、安全性和有效性進(jìn)行比較和評估，以證明變更前后制品特性的高度相似，并確保任何質(zhì)量屬性方面的改變對制品安全性和有效性無負(fù)面影響。
3 質(zhì)量控制
人用重組DNA蛋白制品的質(zhì)量控制與分子大小、結(jié)構(gòu)特征、質(zhì)量屬性復(fù)雜程度以及生產(chǎn)工藝相關(guān)。質(zhì)量控制體系主要包括原輔料質(zhì)量控制、包材、生產(chǎn)工藝和過程控制及制品檢定等。應(yīng)通過終產(chǎn)品檢測、過程控制和工藝驗(yàn)證結(jié)合的方法，確保各類雜質(zhì)已去除或降低至可接受水平。制品質(zhì)量控制包括采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和經(jīng)驗(yàn)證的方法評估已知和（或）潛在制品相關(guān)物質(zhì)和工藝相關(guān)物質(zhì)，以及采用適宜的方法對制品鑒別、生物學(xué)活性、純度和雜質(zhì)等檢測進(jìn)行分析。
3.1 特性分析
研發(fā)階段以物理、化學(xué)和生物學(xué)方法對重組DNA蛋白制品的理化特性、生物學(xué)活性、免疫學(xué)特性、純度和雜質(zhì)等進(jìn)行嚴(yán)格的特性分析鑒定是確保產(chǎn)品安全有效，建立并確定制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)。需采用廣泛的分析技術(shù)來展示目標(biāo)分子的理化性質(zhì)（分子大小、電荷、等電點(diǎn)、氨基酸組成、疏水性等），以及對糖基化等各種翻譯后修飾進(jìn)行充分鑒定，并納入適當(dāng)?shù)臋z測，以確認(rèn)制品具有預(yù)期的構(gòu)象、聚集和（或）降解狀態(tài)及其高級結(jié)構(gòu)。必要時(shí)，應(yīng)采用新型分析技術(shù)用于特性分析。特性分析至少應(yīng)包括以下范疇。
3.1.1 理化特性
3.1.1.1 一級結(jié)構(gòu)
一級結(jié)構(gòu)，即包括二硫鍵連接方式的氨基酸序列（包含二硫鍵的完整性和正確性、游離疏基）。應(yīng)盡可能采用綜合的方法測定目標(biāo)制品的氨基酸序列，并與其基因序列推斷的理論氨基酸序列進(jìn)行比較。
氨基酸序列測定還應(yīng)考慮可能存在的N端甲硫氨酸（如大腸埃希菌來源的制品），信號肽或前導(dǎo)序列和其他可能的N端、C端修飾（如乙?；?、酰胺化或者由于外肽酶導(dǎo)致的部分降解以及C端加工、N端焦谷氨酸等），以及各種其他異質(zhì)性（如脫酰胺化、氧化、異構(gòu)化、碎片化、二硫鍵錯(cuò)配、N-連接和O-連接的寡糖、糖基化、聚集等）。
3.1.1.2 糖基化修飾
應(yīng)對糖基化修飾進(jìn)行全面的分析和確定，如糖基化修飾與制品半衰期和生物學(xué)活性相關(guān)，則應(yīng)確定糖的含量（如中性糖、氨基糖和唾液酸）。糖型結(jié)構(gòu)可能與不良反應(yīng)相關(guān)（如非人類的糖型結(jié)構(gòu)或其殘基），應(yīng)盡可能對糖鏈的結(jié)構(gòu)、糖型以及多肽鏈的糖基化位點(diǎn)進(jìn)行深入分析。必要時(shí)應(yīng)進(jìn)一步就電荷異質(zhì)性進(jìn)行檢測分析。
3.1.1.3 高級結(jié)構(gòu)
應(yīng)通過適合的理化方法分析高級結(jié)構(gòu)，并且通過生物學(xué)功能來確認(rèn)。生物學(xué)活性是對高級結(jié)構(gòu)的確證，也可采用體外或體內(nèi)證實(shí)其治療功能的活性分析方法，作為高級結(jié)構(gòu)確證的補(bǔ)充。
聚乙二醇修飾蛋白質(zhì)的分析不僅限于平均修飾率，還應(yīng)包括修飾位點(diǎn)等分析。
3.1.2 生物學(xué)活性
生物學(xué)活性測定應(yīng)基于制品實(shí)現(xiàn)確定的生物學(xué)效應(yīng)的特定能力或潛力。可采用體外或體內(nèi)方法或生物化學(xué)（包括免疫化學(xué)試驗(yàn)）方法和（或）適宜的物理化學(xué)分析方法進(jìn)行評估，如效價(jià)測定（以單位或國際單位表示）和（或）含量（以質(zhì)量/重量表示）測定。
3.1.3 免疫化學(xué)特性
需全面說明制品的相關(guān)免疫學(xué)特性。應(yīng)采用純化的抗原和抗原確定的區(qū)域進(jìn)行結(jié)合實(shí)驗(yàn)測定免疫學(xué)特性。必要時(shí)應(yīng)確定親和力和免疫反應(yīng)性（包括與其他類似結(jié)構(gòu)蛋白的交叉反應(yīng)性）。應(yīng)對目標(biāo)分子中與相應(yīng)表位作用的部分進(jìn)行分析確證，包括對這些結(jié)構(gòu)的生物化學(xué)鑒別（如蛋白質(zhì)、低聚糖、糖蛋白、糖脂）和相關(guān)適合的特征研究（如氨基酸序列和糖型）。
糖基化和聚乙二醇化可能影響制品的藥理學(xué)性質(zhì)和免疫原性，應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶匦匝芯俊?/p>
3.1.4 純度、雜質(zhì)和污染物
生物技術(shù)制品雜質(zhì)主要包括制品相關(guān)雜質(zhì)、工藝相關(guān)雜質(zhì)以及外源污染物。應(yīng)盡可能地對雜質(zhì)進(jìn)行分析鑒定，并采用適宜的方法評價(jià)其對生物學(xué)活性的影響。
3.1.4.1 制品相關(guān)物質(zhì)/雜質(zhì)
制品相關(guān)物質(zhì)/雜質(zhì)主要源于生物技術(shù)制品異質(zhì)性和降解產(chǎn)物。末端氨基酸異質(zhì)性、電荷異質(zhì)性、分子大小變異體以及包括糖基化在內(nèi)的各類翻譯后修飾等異質(zhì)性（如C端加工、N端焦谷氨酸化、脫酰胺化、氧化、異構(gòu)化、片段化、二硫鍵錯(cuò)配、N-連接和O-連接的寡糖、糖基化、聚集）可能導(dǎo)致其組成中存在幾種分子或變異體，應(yīng)對目標(biāo)制品的各種分子變異體進(jìn)行分離、鑒別和分析，如變異體的活性與目標(biāo)制品一致時(shí)，可不作為雜質(zhì)。但應(yīng)考慮在生產(chǎn)和（或）貯存期間產(chǎn)品降解產(chǎn)物是否顯著增加及其與免疫原性的相關(guān)性。
3.1.4.2 工藝相關(guān)雜質(zhì)
工藝相關(guān)雜質(zhì)包括來源于生產(chǎn)工藝本身，主要涉及細(xì)胞基質(zhì)來源、細(xì)胞培養(yǎng)來源和下游工藝三個(gè)階段。應(yīng)對潛在的工藝相關(guān)雜質(zhì)（如宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)、宿主細(xì)胞DNA、細(xì)胞培養(yǎng)殘留物、下游工藝的殘留物等）進(jìn)行鑒別、評估，并進(jìn)行定性和（或）定量分析。
3.1.4.3 污染物
污染物系指所有引入且并非生產(chǎn)過程所需的物質(zhì)（如各種微生物、細(xì)菌內(nèi)毒素）。應(yīng)嚴(yán)格避免引入污染物并對其進(jìn)行相應(yīng)控制。此外，還應(yīng)考慮采用其他適宜檢測方法，對可能污染的包括肽聚糖等在內(nèi)的“非細(xì)菌內(nèi)毒素促炎性污染物”進(jìn)行控制。
3.1.5 含量
應(yīng)采用適宜的物理化學(xué)和（或）免疫化學(xué)方法進(jìn)行含量測定。以適宜的參考品為對照，蛋白質(zhì)含量（以質(zhì)量或重量/體積表示）可通過合適的方法進(jìn)行測定（如HPLC）。蛋白質(zhì)含量也能通過一個(gè)絕對定量的方法測定，可采用第二種絕對定量的含量測定方法進(jìn)行溯源和驗(yàn)證，如果偏差太大，應(yīng)考慮采用其他方法重新測定。
3.1.6 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
應(yīng)選擇已證明足夠穩(wěn)定且適合臨床試驗(yàn)的一個(gè)（多個(gè)）批次，或用一個(gè)代表批次作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用于鑒別、理化和生物學(xué)活性等各種分析，根據(jù)重組DNA蛋白制品特性，應(yīng)采用現(xiàn)有最先進(jìn)的方法對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)做全面深入的表征/特性分析。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的建立和制備可參照“生物制品國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備和標(biāo)定”的相關(guān)要求。
用于理化測定等方面的對照品，如用于肽圖或等電點(diǎn)測定的對照品，可用原液直接分裝制得，一般-70℃以下保存。根據(jù)重組DNA蛋白制品特性應(yīng)對對照品進(jìn)行必要的分析鑒定，包括蛋白質(zhì)含量、比活性、等電點(diǎn)、純度、N端氨基酸序列、質(zhì)譜分子量、液質(zhì)肽圖、二硫鍵分析、糖基分析（真核表達(dá)）等。
3.2 制品檢定
應(yīng)根據(jù)制品特性確定制品檢定中需要進(jìn)行的特性分析檢測項(xiàng)目。建立或驗(yàn)證制品生產(chǎn)過程的有效性或可接受性的特性分析檢測項(xiàng)目可不納入常規(guī)質(zhì)量控制中，但應(yīng)對某一特定質(zhì)量屬性是否放入常規(guī)放行標(biāo)準(zhǔn)予以說明。
應(yīng)根據(jù)一定數(shù)量的連續(xù)批次分析數(shù)據(jù)確定的批內(nèi)和批間一致性分析數(shù)據(jù)，綜合臨床和非臨床研究，以及穩(wěn)定性評價(jià)數(shù)據(jù)建立制品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括各種分析方法及具體數(shù)值限度、可接受標(biāo)準(zhǔn)范圍，以保證原液、成品或原材料在其生產(chǎn)的各階段符合其預(yù)期的質(zhì)量要求。可接受標(biāo)準(zhǔn)的范圍確定應(yīng)該考慮到所使用的分析方法的靈敏度。常規(guī)放行質(zhì)量控制至少應(yīng)包括以下方面。
3.2.1 鑒別
鑒別試驗(yàn)應(yīng)高度特異，并應(yīng)基于分子結(jié)構(gòu)和（或）其他特有的專屬性進(jìn)行分析（如肽圖、抗獨(dú)特型免疫或其他適宜的方法）。根據(jù)制品特性，選擇理化、生物和（或）免疫化學(xué)中的一種或一種以上的檢測方法進(jìn)行鑒別試驗(yàn)。
3.2.2 純度和雜質(zhì)
應(yīng)采用類似正交組合的方法來評估制品純度/雜質(zhì)，并為制品相關(guān)的變異體建立單獨(dú)和（或）總體的可接受標(biāo)準(zhǔn)。質(zhì)量控制中包括的工藝相關(guān)雜質(zhì)的質(zhì)量控制（如蛋白A、宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)、DNA、其他潛在的培養(yǎng)或純化殘留物等）通常在原液階段進(jìn)行。如經(jīng)充分驗(yàn)證證明生產(chǎn)工藝對工藝相關(guān)雜質(zhì)的去除已達(dá)到高水平時(shí)，工藝相關(guān)雜質(zhì)的質(zhì)量控制可在恰當(dāng)工藝步驟的中間產(chǎn)物進(jìn)行，可不列入常規(guī)放行檢定中。
3.2.3 效價(jià)
效價(jià)測定是以制品生物學(xué)特性相關(guān)屬性為基礎(chǔ)的生物學(xué)活性定量分析，原則上效價(jià)測定方法應(yīng)盡可能反映或模擬其作用機(jī)制。比活性（每毫克制品具有的生物學(xué)活性單位）對證明制品的一致性具有重要的價(jià)值。
應(yīng)采用適宜的國家或國際標(biāo)準(zhǔn)品或參考品對每批原液和成品進(jìn)行效價(jià)測定。尚未建立國際標(biāo)準(zhǔn)品/國家標(biāo)準(zhǔn)品或參考品的，應(yīng)采用經(jīng)批準(zhǔn)的內(nèi)控參比品。標(biāo)準(zhǔn)品和參考品的建立或制備應(yīng)符合“生物制品國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備和標(biāo)定”。
3.2.4 含量
采用適宜方法和參考品作為對照，測定原液和成品的含量。
3.2.5 安全性試驗(yàn)
應(yīng)根據(jù)相關(guān)制品的各論視情況而定。檢測應(yīng)至少包括無菌、細(xì)菌內(nèi)毒素、異常毒性檢查等。
3.2.6 其他檢測項(xiàng)目
應(yīng)根據(jù)相關(guān)制品的特性而定。檢測應(yīng)包括外觀（例如性狀、顏色）、可見異物及不溶性微粒檢查，溶解度、pH值、滲透壓摩爾濃度、裝量、穩(wěn)定劑和水分測定等。
3.3 包裝及密閉容器系統(tǒng)
應(yīng)對原液和成品與容器的相容性、容器吸附、制品和包裝材料之間的浸出進(jìn)行檢測和確認(rèn)，以避免蛋白質(zhì)和制劑輔料和（或）容器包裝系統(tǒng)發(fā)生相互作用，導(dǎo)致對制品的安全性和有效性帶來潛在風(fēng)險(xiǎn)。此外，應(yīng)采用適宜方法對容器完整性進(jìn)行檢測，防止容器泄漏導(dǎo)致產(chǎn)品無菌狀態(tài)的破壞。
4 貯存、有效期和標(biāo)簽
制品貯存應(yīng)符合“生物制品分包裝及貯運(yùn)管理”規(guī)定，成品應(yīng)在適合的環(huán)境條件下貯存和運(yùn)輸。自生產(chǎn)之日起，按批準(zhǔn)的有效期執(zhí)行。
標(biāo)簽應(yīng)符合“生物制品分包裝及貯運(yùn)管理”要求和國家相關(guān)規(guī)定，標(biāo)示內(nèi)容至少應(yīng)包括：
?。?）每瓶或每1ml 的活性單位（如必要）；
?。?）每瓶有效成分含量和（或）蛋白質(zhì)含量；
（3）每瓶標(biāo)示體積；
?。?）凍干制劑復(fù)溶液體的名稱、體積及復(fù)溶后的使用期限；
（5）使用前進(jìn)行適量稀釋（如果需要）；
?。?）有效期。
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