生物樣品的樣品處理及貯存方法介紹
對許多生物樣品,需要進(jìn)行最初的預(yù)處理。這種預(yù)處理應(yīng)該在采樣后立即進(jìn)行。例如,在分析貝殼類樣品中的微量元素時,需要將貝殼外層的沉積物清洗干凈,然后開殼,采集整個貝肉或個別部位。同樣,水生植物如海藻等亦需要仔細(xì)清洗以除去沉積物、寄生植物或其他類似的表面沾污。必須注意樣品的代表性。微量元素往往在一些特殊的部位有更大的濃度,如植物根和葉子等,而且植物的大小與濃度也有關(guān)系,如果分析單個樣品時這些特點采樣時就應(yīng)注意。上述樣品采集后如不馬上進(jìn)行分析應(yīng)該冷藏。處理上述樣品時應(yīng)戴聚乙烯手套,樣品存放于塑料袋或塑料容器中。對于頭發(fā)樣品,為了清洗干凈以排除外來元素,可以使用一些清洗辦法進(jìn)行微量元素分析發(fā)樣的處理,可以在0.1% Triton-X100中,用超聲波振蕩儀處理,過濾后用甲醇沖洗,然后在空氣中用吹風(fēng)機吹干。
對于血液樣品的處理,要根據(jù)全血、血漿及血清的不同要求而進(jìn)行前處理。全血短期內(nèi)可以在4℃貯存,冷凍效果較好,但冷藏往往導(dǎo)致沉淀出現(xiàn)。解凍時沉淀出的固體加酸可以溶解。
樣品的均勻往往是處理大量樣品的第二步,如果使用機械勻漿器,刀片的沾污問題需要考慮。少量樣品也可以直接溶解在濃鹽酸或強堿里,季銨鹽的氫氧化物也經(jīng)常用來溶解少量組織樣品。如在20%的四甲基氫氧化銨中浸泡2h,可以有效地從蛋白質(zhì)和脂肪中游離出烷基鉛化合物,這種提取方法適合于魚、海藻和其他海生植物的處理。提取時在60℃水浴中加熱可以加快提取速度。
高壓燜罐也經(jīng)常用于樣品處理,這種方法可以有效地防止樣品處理時的沾污。微量元素的空白非常低。在高壓溶樣前,樣品一般經(jīng)凍干或風(fēng)干后,再經(jīng)高壓處理,高壓燜罐的溫度控制要根據(jù)不同樣品的需求而定,一般而言,在160-180℃下處理6h即可得到滿意的結(jié)果。
冷凍干燥是除去固體生物樣品中水分的好辦法,可以避免微量元素的損失或樣品沾污,少量樣品時這個方法較為適宜。在通風(fēng)櫥中控制溫度在100℃左右連續(xù)加熱,是一種最方便的方法,但是容易揮發(fā)的組分,像元素汞和其他一些有機金屬化合物極易在此期間損失。
馬弗爐在500℃時可以分解大多數(shù)有機化合物,也適合Hg、As、Sn、Se、Pb、Ni、Cr等樣品的處理。
凍干或消解的樣品比較容易保存,在萃取前或溶解前,需要重新混合均勻。