簡(jiǎn)單介紹一下每種色譜柱的適用范圍
1、C18柱C18色譜柱是最常用、每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必備的通用型色譜柱。填料是硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基,有較高的碳含量和較好的疏水性,適用于大多數(shù)化合物,包括非極性、極性小分子及一些多肽及蛋白質(zhì)。隨著每家色譜柱制造商的研發(fā),C18柱的類型還在不斷增加。適用pH范圍由原來(lái)的2~8,發(fā)展到現(xiàn)在1~14,與純水相的兼容性越來(lái)越好,某些色譜柱即使長(zhǎng)時(shí)間使用100%水相,也不會(huì)發(fā)生填料疏水塌陷。對(duì)于每位實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō),可供選擇的范圍日趨廣泛。
2、苯基柱苯基柱與C18柱相似,是在硅烷基上鍵合一個(gè)苯環(huán)。這造成了對(duì)于有些特殊的化合物(如芳香族化合物)在反相保留時(shí)與C18有不同的選擇性。在某些條件下,可以將C18無(wú)法分離的化合物分離。
3、五氟苯基柱五氟苯基柱的填料顆粒是硅烷基上鍵合一個(gè)五氟苯基。與常規(guī)的C18保留機(jī)制相似,但提供了不同的分離選擇性,提高了對(duì)極性樣品的保留,特別是對(duì)鹵族化合物。
4、氨基柱氨基柱是在硅膠的硅羥基上鍵合了酰胺基,屬于HILIC模式的色譜柱,其保留機(jī)制比較復(fù)雜,主要是液液分配、吸附作用、離子相互作用和親水性保留作用的多模式組合。主要用于分析極性大的化合物,還適合用于糖類化合物的分析,如1,5一脫水葡萄糖醇。主要的優(yōu)點(diǎn)是可以使用高有機(jī)相分析反相保留弱的化合物,對(duì)質(zhì)譜離子化有更好的兼容性,提高檢測(cè)靈敏度。
5、裸硅膠柱未雜化的硅膠顆粒色譜柱在日常的分析中也常用于液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用方法,硅膠柱與氨基柱有相似的保留基質(zhì)及優(yōu)點(diǎn),同屬HILIC模式的色譜柱。主要用于極性化合物的分析,特別是強(qiáng)極性堿性水溶性化合物,如生物堿、腎上腺素系列。