色譜的分離度什么因素會影響
又稱分辨率,為了判斷分離物質(zhì)對色譜柱在色譜柱中的分離情況,常用分離度作為柱的總分離效能指標(biāo).用R表示.R等于相鄰色譜峰保留時間之差與兩色譜峰峰寬均值之比.
resolution,R
相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度。R越大,表明相鄰兩組分分離越好。一般說當(dāng)R<1時,兩峰有部分重疊;當(dāng)R=1.0時,分離度可達98%;當(dāng)R=1.5時,分離度可達99.7%。通常用R=1.5作為相鄰兩組分已完全分離的標(biāo)志。當(dāng)R=1時,稱為4σ分離,兩峰基本分離,裸露峰面積為95.4%,內(nèi)側(cè)峰基重疊約2%。R=1.5時,稱為6σ分離,裸露峰面積為99.7%。R≥1.5稱為完全分離?!吨袊幍洹芬?guī)定R應(yīng)大于1.5。
分離度計算公式:R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)
(以上參考百度百科)
影響它的因素主要有以下幾個:
1、柱子的長短與填料的粒徑。柱子越長所裝填料也越多,表面積也越大,吸附力也越大,所以分離能力也就高。同樣同等長度的柱子粒徑越細的,表面積也就越大,分離也就越好。
2、流動相(考慮反相條件下):
a:水相與有機相比例的大小,有機相高洗脫力強,組份在流動員相中分配的多,填料對其吸附能力弱,因此分離能力也就低。
b、不同溶劑的選擇:拿甲醇和乙腈來說,它們倆的分離選擇能力就不同。乙腈是非質(zhì)子性,甲醇是質(zhì)子性。所以當(dāng)(甲醇)乙腈分離不好是,可以考慮一下乙腈(甲醇)。
3、溫度:溫度高傳質(zhì)阻力會低,同樣柱壓力也會低,因此會使保留時間縮短,對分離有一定影響(只要溫度不是偏離室溫很大,對分離的影響不是很大)
4、流動的PH值。在分離一些酸、堿物質(zhì)的時候,PH對分離的影響是很大的,有的會影響到出峰的順序。因為在不同的PH下它們的解離狀態(tài)會不同,因此會造就填料對它們的吸附能力改變。
5、離子對的添加(分離酸、堿化合物時),烷基銨鹽類在PH=7.5時與強酸和弱酸形成離子對具有緩沖抑制弱堿作用。烷基磺酸鹽在PH=3.5條件下與強堿和弱堿形成離子對,并緩沖抑制弱酸離子。