色譜的分離度是怎么回事
又稱分辨率,為了判斷分離物質(zhì)對(duì)色譜柱在色譜柱中的分離情況,常用分離度作為柱的總分離效能指標(biāo).用R表示.R等于相鄰色譜峰保留時(shí)間之差與兩色譜峰峰寬均值之比.
resolution,R
相鄰兩峰的保留時(shí)間之差與平均峰寬的比值.也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度.R越大,表明相鄰兩組分分離越好.一般說當(dāng)R＜1時(shí),兩峰有部分重疊；當(dāng)R=1.0時(shí),分離度可達(dá)98%；當(dāng)R=1.5時(shí),分離度可達(dá)99.7%.通常用R=1.5作為相鄰兩組分已完全分離的標(biāo)志.當(dāng)R＝1時(shí),稱為4σ分離,兩峰基本分離,裸露峰面積為95.4%,內(nèi)側(cè)峰基重疊約2%.R＝1.5時(shí),稱為6σ分離,裸露峰面積為99.7%.R≥1.5稱為完全分離.《中國(guó)藥典》規(guī)定R應(yīng)大于1.5.
分離度計(jì)算公式：R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)
影響它的因素主要有以下幾個(gè)：
1、柱子的長(zhǎng)短與填料的粒徑.柱子越長(zhǎng)所裝填料也越多,表面積也越大,吸附力也越大,所以分離能力也就高.同樣同等長(zhǎng)度的柱子粒徑越細(xì)的,表面積也就越大,分離也就越好.
2、流動(dòng)相（考慮反相條件下）：
a：水相與有機(jī)相比例的大小,有機(jī)相高洗脫力強(qiáng),組份在流動(dòng)員相中分配的多,填料對(duì)其吸附能力弱,因此分離能力也就低.
b、不同溶劑的選擇：拿甲醇和乙腈來說,它們倆的分離選擇能力就不同.乙腈是非質(zhì)子性,甲醇是質(zhì)子性.所以當(dāng)（甲醇）乙腈分離不好是,可以考慮一下乙腈（甲醇）.
3、溫度：溫度高傳質(zhì)阻力會(huì)低,同樣柱壓力也會(huì)低,因此會(huì)使保留時(shí)間縮短,對(duì)分離有一定影響（只要溫度不是偏離室溫很大,對(duì)分離的影響不是很大）
4、流動(dòng)的PH值.在分離一些酸、堿物質(zhì)的時(shí)候,PH對(duì)分離的影響是很大的,有的會(huì)影響到出峰的順序.因?yàn)樵诓煌腜H下它們的解離狀態(tài)會(huì)不同,因此會(huì)造就填料對(duì)它們的吸附能力改變.
5、離子對(duì)的添加（分離酸、堿化合物時(shí)）,烷基銨鹽類在PH=7.5時(shí)與強(qiáng)酸和弱酸形成離子對(duì)具有緩沖抑制弱堿作用.烷基磺酸鹽在PH=3.5條件下與強(qiáng)堿和弱堿形成離子對(duì),并緩沖抑制弱酸離子.
