外泌體的提純方式有哪些
一、超速離心法,這是目前外泌體提取常用的方法 。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊, 由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種 方法得到的是微泡不是外泌體 。
二、過濾離心, 這種操作簡單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性 ,但同樣存在純度不足的問題。
三、密度梯度離心法, 用此種方法分離到 的外泌體純度 高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時(shí),量少。
四、免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài) 的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,但是非中性pH 和非 生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性, 不便進(jìn)行接下來的實(shí)驗(yàn) 。
五、PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9 nature雜志發(fā)表了該方法的新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。
六、色譜法,這種方法分離到的外泌體在 電鏡下大小均 一, 但是需要特殊的設(shè)備 , 應(yīng)用不廣泛 。
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技術(shù)原理