BIOGHC SYBR Green熒光定量PCR試劑盒說明
介紹?
BIOGHC Elitefast SYBR Kit采用本公司生產(chǎn)的經(jīng)化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，有效避免了非特異擴(kuò)增和引物二聚體的形成，具有高度的特異性。反應(yīng)緩沖液經(jīng)多次優(yōu)化，與熱啟動(dòng)聚合酶具有最為樂觀的搭配，使聚合酶的活性能夠得到最大程度的發(fā)揮。反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘的時(shí)間。在20μl的反應(yīng)體系里，只要有幾個(gè)拷貝的DNA分子就能被檢測(cè)出來。BIOGHC Elitefast SYBR kit具有非常強(qiáng)的抗干擾能力，能夠?qū)ν寥?、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)，也能不經(jīng)處理直接對(duì)菌落、血液、土壤和糞便中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。試劑盒以預(yù)混液的形式包裝，使用極其方便。
產(chǎn)品特點(diǎn)
◎使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，最大程度地避免了非特異擴(kuò)增；
◎反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
◎抗干擾能力強(qiáng)，即使是血液、腫瘤、菌落等復(fù)雜樣本，也能獲得較為理想的結(jié)果。
產(chǎn)品成分???????????????????????? 反應(yīng)體系
?
|
組????分 |
100個(gè)反應(yīng) |
200個(gè)反應(yīng) |
500個(gè)反應(yīng) |
|
ddH2O |
1.2ml |
1.2ml?×?2 |
1.25ml?×?4 |
|
2×BIOGHC?Elitefast?SYBR?Mastermix |
1.0ml |
1.0ml?×?2 |
1.25ml?×?4 |
|
50×ROX?Reference?Dye? |
40μl |
80μl |
200μl |
?
|
2xBIOGHC?Elitefast?SYBR?Mastermix |
10μl |
|
上下游引物?(10μM) |
各0.4μl |
|
模板DNA |
10ng-1μg |
|
50?×?ROX |
0.4μl |
|
ddH2O |
加至20μl |
說明：
1、BIOGHC Elitefast SYBR Master Mix包含dNTP Mix、Mg2+、SYBR Green I、BIOG熱啟動(dòng)聚合酶。
2、一般來說反應(yīng)體系中引物終濃度為0.2μM可得到較好的擴(kuò)增效果。當(dāng)反應(yīng)結(jié)果不理想時(shí)，可以在0.1-1.0μM范圍內(nèi)調(diào)整引物濃度。
3、qPCR反應(yīng)靈敏性高，模板量的準(zhǔn)確性對(duì)結(jié)果影響很大，建議將模板適度稀釋后加入，或用50ul反應(yīng)體系。
4、模板體積最好不超過反應(yīng)體積的10%，操作過程中避免強(qiáng)光照射。
5、擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度請(qǐng)選擇在100bp-500bp范圍內(nèi)。
6、反應(yīng)條件：95℃加熱6-10分鐘，以激活熱啟動(dòng)DNA聚合酶，然后95℃ 5-15秒，60℃ 30-35秒，進(jìn)行40個(gè)循環(huán)。反應(yīng)條件可根據(jù)目標(biāo)片段的大小、引物的Tm值等適當(dāng)調(diào)整。
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性?
干冰或藍(lán)冰運(yùn)輸，-20°C避光保存，避免反復(fù)凍融。如每次使用量較少，推薦小份分裝使用。
有效期
-20℃保存條件下，有效期為6個(gè)月。
質(zhì)量控制
所有組分經(jīng)檢測(cè)均無核酸外切酶，核酸內(nèi)切酶殘留。
注意
本產(chǎn)品僅用于科研
