CRISPR分子診斷技術(shù)（七）
39 ??加上Cas9，它們?yōu)榉肿釉\斷和基因編輯提供了多樣靈活的工具。
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40??? CRISPR分子診斷技術(shù)并不是只有Doudna和張鋒兩家在開發(fā)。2019年3月，在Keck Graduate Institute任職的Kiana Aran博士與合作者在Nature Biomedical Engineering的一篇論文中展示了一個(gè)全新技術(shù)CRISPR-Chip。這一技術(shù)將CRISPR和石墨烯膜場(chǎng)效應(yīng)晶體管（gFET）技術(shù)結(jié)合起來。以石墨烯膜為基礎(chǔ)的晶體管上載有dCas9（只有識(shí)別功能，沒有剪切功能）和sgRNA的復(fù)合體。當(dāng)樣品滴加到膜上，一旦dCas9-sgRNA識(shí)別并結(jié)合相應(yīng)的靶DNA分子，晶體管就發(fā)出一個(gè)電信號(hào)。在SHERLOCK和DETECTR中，“剪切”產(chǎn)生信號(hào)；而在CRISPR-Chip中，“結(jié)合”產(chǎn)生信號(hào)。與SHERLOCK、DETECTR相比，CRISPR-Chip技術(shù)的缺點(diǎn)是需要特制的儀器，但優(yōu)點(diǎn)是待測(cè)DNA不需要擴(kuò)增。Aran聯(lián)合創(chuàng)立了一家生物傳感器公司NANOSENS來開發(fā)CRISPR-Chip技術(shù)。
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41 ?Doudna聯(lián)合創(chuàng)立了Mammoth Biosciences以專注開發(fā)DETECTR技術(shù)。Mammoth在2018年4月公開亮相，并于同年7月宣布成功完成A輪融資2300萬美元。公司的其他幾名聯(lián)合創(chuàng)始人都是剛畢業(yè)不久的博士。其中，Chen和Harrington曾是Doudna的博士研究生，剛于2018年畢業(yè)，是2018年2月和10月那兩篇Science論文的并列第一或第二作者。
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??張鋒聯(lián)合創(chuàng)立了Sherlock
Biosciences專注于開發(fā)SHERLOCK技術(shù)。公司雖然在2019年3月才成立，但已經(jīng)融資4900萬美元。前文提到的兩名聯(lián)合創(chuàng)始人Abudayyeh和Gootenberg曾是張鋒的博士生，也剛畢業(yè)不久。但與Mammoth的創(chuàng)始人的情況不同，兩人決定繼續(xù)在學(xué)術(shù)界耕耘，而把公司交給資深專業(yè)團(tuán)隊(duì)管理。
圖片來源：http://sherlock.bio/
43 ?? CRISPR分子診斷技術(shù)雖然還沒有產(chǎn)品上市，但前景一片光明。CRISPR-Dx是典型的“顛覆性創(chuàng)新”，先從低端市場(chǎng)（POCT）切入，但有改變IVD產(chǎn)業(yè)格局的巨大潛力。?它既具有qPCR、ddPCR等其它分子診斷技術(shù)的卓越性能，又不依賴于復(fù)雜的儀器，而且具有金標(biāo)免疫層析方法的方便性和低成本。CRISPR-Dx極有可能比CRISPR-Rx更快地到達(dá)市場(chǎng)。
44 ??我們可以預(yù)料，Doudna和張鋒未來在CRISPR分子診斷領(lǐng)域也會(huì)有ZL之爭(zhēng)。雙方在CRISPR基因編輯和Cas9上的知識(shí)產(chǎn)權(quán)之爭(zhēng)到現(xiàn)在還無定論。但如圖所示，和基因編輯IP有一點(diǎn)不同的是，雙方與診斷有關(guān)的主要ZL申請(qǐng)都是在2013年之后遞交的。2013年3月，美國(guó)ZL歸屬?gòu)摹癴irst-to-invent”轉(zhuǎn)變?yōu)椤癴irst-to-file”系統(tǒng)。也許在新的系統(tǒng)下雙方的ZL權(quán)劃分會(huì)清楚一些。但他們關(guān)于診斷的IP有不少重疊，完全分割清楚并不是一件容易的事。雙方最好的選擇也許是簽署合作協(xié)議，交叉許可各自的ZL。
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45 ??也許多年以后，Doudna和張鋒回首往事，會(huì)對(duì)曾有過的ZL之爭(zhēng)一笑了之。也許多年以后，我們回望這段歲月，才意識(shí)到這是一個(gè)風(fēng)起云涌、英雄輩出的時(shí)代。而我們則有幸見證甚至參與了一連串的革命性生物醫(yī)學(xué)技術(shù)的誕生和普及：anti-PD-1/PD-L1, CRISPR, CAR-T, iPSC, NGS……星漢燦爛，若出其里，人類的創(chuàng)造力無窮無盡。這更是一個(gè)創(chuàng)新的時(shí)代。（完）
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