pcr內(nèi)參大小
初次做PCR,將反轉(zhuǎn)錄RNA濃度統(tǒng)一調(diào)整到900ng(20μl體系)后, 即45ng/μl。然后按照程序進(jìn)行熒光定量PCR,但是在實(shí)際中,內(nèi)參基因(β-actin)的CT值范圍從16-21不等。主要疑問有兩個(gè),第一,內(nèi)參CT值范圍多大合適,是一致才可靠嗎?第二,目的基因CT值,在實(shí)際測(cè)定中空白的CT值大約在30左右,那是否意味著目的基因大于30就沒有太大意義,只是表明其表達(dá)量很低
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