生物酶學(xué)基礎(chǔ)--酶的固定化方法介紹
酶的固定化方法不下百種,歸納起來(lái)大致可以分為三類(lèi),即載體結(jié)合法、交聯(lián)法和包埋。
載體結(jié)合法是指將酶固定到非水溶性載體上的方法。根據(jù)固定方式的不同,這種方法又可以分為物理吸附法、離子結(jié)合法和共價(jià)結(jié)合法。物理吸附法是指將酶吸附到固體吸附劑表面的方法,固體吸附劑多為活性碳、多孔玻璃等。離子結(jié)合法是指通過(guò)離子鍵將酶結(jié)合到具有離子交換基團(tuán)的非水溶性載體上的方法,載體有離子交換樹(shù)脂等。共價(jià)結(jié)合法是指酶和載體以共價(jià)鍵的形式結(jié)合在一起的方法,這種方法需要酶和載體都具有氨基、羧基或羥基等官能團(tuán)。
交聯(lián)法是指通過(guò)雙功能試劑,將酶和酶聯(lián)結(jié)成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的方法。交聯(lián)法使用的交聯(lián)劑是戊二醛等水溶性化合物。
包埋法是指將酶包裹在多孔的載體中,如將酶包裹在聚丙烯酰胺凝膠等高分子凝膠中,或包裹在硝酸纖維素等半透性高分子膜中。前者包埋成格子型,后者包埋成微膠囊型。
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