實時熒光定量PCR跑膠與普通PCR有區(qū)別嗎
Real time PCR一般是不用跑膠的,普通PCR一般都需要通過跑膠來確定結(jié)果。但有時候Real time PCR完成后有些人為了更確定實驗結(jié)果也會跑一下。 如果說區(qū)別的話,對于同一個基因來說Real time PCR為了提高擴增效率(往往循環(huán)數(shù)比較多),設(shè)計的引物都只能擴增出較小的片段,而同一基因的普通PCR擴增的片段往往會大一些。也就是說跑出的條帶二者是有差別的。當(dāng)然,如果你直接用普通PCR的引物去跑Real time PCR的話,結(jié)果基本會是一致的,當(dāng)然,由于循環(huán)數(shù)的不同,亮度也會有差別。
PS:普通PCR也是可以用在做定量的,雖然不精確,但做基因表達量的話光一個Real time PCR結(jié)果,很多高檔次的刊物一些老外審稿們往往不認可,需要你做一個普通的反轉(zhuǎn)錄PCR來作為輔證。
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綜述