體液免疫的B細胞的基本內(nèi)容
原發(fā)性免疫缺陷和繼發(fā)性免疫缺陷均可導(dǎo)致體液免疫功能下降。原發(fā)性體液免疫功能缺陷可能由于B細胞分化障礙，細胞內(nèi)合成Ig功能紊亂或由于抑制性細胞功能過強。繼發(fā)性體液免疫功能降低可能由于蛋白質(zhì)大量丟失，蛋白質(zhì)吸收障礙、營養(yǎng)不良、免疫抑制治療的副作用，病毒感染（艾滋?。┑?。在診斷原發(fā)性體液免疫功能缺損中可檢查B細胞的數(shù)目和功能以確定造成缺損的原因。
1．外周血B細胞數(shù)目的檢測首先進行常規(guī)的外周血白細胞總數(shù)和分類計數(shù)檢查，這些結(jié)果是評價病人免疫系統(tǒng)功能狀態(tài)的基本資料。由于在全血中淋巴細胞所占比例很少，而T細胞和B細胞不能藉形態(tài)學(xué)特征分類，所以外周血B細胞數(shù)檢測需先從全血分離出富含淋巴細胞的單個核細胞（peripheral blood mononuclear cell,PBM）。再依靠B細胞表面有免疫球蛋白分子或其他特征來檢查B細胞。常用的方法是將待檢者的PBM用FITC標(biāo)記的免疫抗人Ig作直接免疫熒光染色，在熒光顯微鏡下顯熒光的細胞為帶有表面免疫球蛋白的B細胞。正常人B細胞的約占PBM的10%。
2．外周血B細胞功能的檢測 分離受檢者血液PBM細胞，體外培養(yǎng)時加入B細胞刺激物如RWM（美洲商陸刺激素）或SAC（金黃色莆萄球菌來源的刺激物）后由B細胞變成Ig分泌細胞的數(shù)量。體液免疫功能缺損患者，其PBM對PWM和SACA刺激的反應(yīng)降低，產(chǎn)生Ig分泌細胞數(shù)正常人顯著減少。在進一步檢查這種免疫缺損的原因，則應(yīng)檢查是由B細胞或TH細胞缺損所致，還是由于TS細胞數(shù)量或活性增強引起的。
抗體形成細胞計數(shù)：檢查人類Ig分泌細胞是用反向溶血空斑檢測（reversed hemolytic
plaque assay）法。將待檢人的PBM、用SPA包被的SRBC（SPA-SRBC）、兔抗人Ig抗體、補體四種成分混合，灌入用兩張玻片做成的小室，密封好，放入溫箱培養(yǎng)1-3小時，，在此期間，作為抗人Ig抗體的免疫IgG的FC段可與SRBC表面SPA結(jié)合，當(dāng)Ig分細胞分泌出游離的Ig分子時，這些人Ig分子與SRBC表面的抗人Ig抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物，即可活化補體，使SPA-SRBC溶解，因此在Ig分泌細胞周圍形成一個圓形的溶血區(qū)，稱為溶血空斑，每一個溶血的空斑就代表一個Ig分泌細胞。
檢查小鼠Ig分泌細胞應(yīng)用的溶血空斑試驗比較簡單，即SRBC免疫注射小鼠，4天后取脾制成單個細胞懸液，加入一定量SRBC（靶細胞）混合，在補體參加下，產(chǎn)生抗體的細胞分泌出的Ig與SRBC（抗原）結(jié)合在補體作用下，溶血，表現(xiàn)肉眼可見的溶血空斑。計數(shù)空斑數(shù)代表分泌抗體的細胞數(shù)。
