聚合酶鏈反應(PCR) 技術(shù)--引物的最終評估
當我們經(jīng)過初次篩選和二次篩選后得到的那對引物便可以用于合成,合成后我們經(jīng)過 PCR擴增可以對引物進行最終的評估。
一是PCR擴增的特異性和效率。經(jīng)過PCR條件優(yōu)化后能否獲得特異性條帶,即無目的條帶之外的多余條帶。另外,PCR產(chǎn)物的量是否足夠,即無不出帶和條帶很弱的現(xiàn)象。
二是以DNA為模板設(shè)計引物時,PCR擴增產(chǎn)物是否與預期PCR產(chǎn)物大小相當。如果相差太大G 于100 b ,有可能是錯配產(chǎn)物。
三是是否形成引物二聚體帶。
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