real-time PCR中內(nèi)參基因的CT值
這個(gè)要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內(nèi)參做出來差別大（比如3-4個(gè)CT值）那說明你的實(shí)驗(yàn)體系有嚴(yán)重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內(nèi)參的CT值應(yīng)該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實(shí)驗(yàn)處理對(duì)內(nèi)參的量產(chǎn)生了影響，必須換一個(gè)基因做內(nèi)參。還有就是你的加樣量誤差很大。這樣的話，建議你內(nèi)參和目的基因在一個(gè)管子內(nèi)做。各自選用不同的顏色標(biāo)記的探針，不用CYBR Green。這樣就沒有任何加樣誤差了。
這個(gè)所謂的“校正”就是保持每個(gè)樣本的加樣量的一致。
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