瓊脂糖凝膠電泳操作應(yīng)注意哪些環(huán)節(jié)
1. 根據(jù)片段大小配制不同濃度的膠(改變分辨率),片段越小,需要膠濃度越大。
2. 膠要現(xiàn)制先用。
3. 選擇合適的Marker。
4. 配膠的緩沖液與電泳緩沖液要是同一種,且濃度一致(1倍)。
5. 點(diǎn)樣時(shí)要加入loading buffer,并注意,不要將樣點(diǎn)到點(diǎn)樣孔之外(飄樣),也不要將膠戳漏(漏樣)。
6. 根據(jù)片段大小,及電泳檢測(cè)目的,選擇合適的電壓及電泳時(shí)間。
7. EB染色。可選擇制膠時(shí)加入EB(要在溶玩膠后,且溫度至室溫時(shí)(用手握住制膠容器,不燙手即可));或電泳結(jié)束后,將膠放入EB溶液中染色。
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