DNA拓撲異構酶催化反應的相關介紹
很多,其反應本質是先切斷DNA的磷酸二脂鍵,改變DNA的鏈環(huán)數(shù)之后再連接之,兼具DNA內切酶和DNA連接酶的功能.然而它們并不能連接事先已經(jīng)存在的斷裂DNA,也就是說,其斷裂反應與連接反應是相互耦聯(lián)的。拓撲異構酶(包括Ⅰ型和II型)都可以用符號轉化模型進行解釋
除了DNA拓撲異構酶可以產(chǎn)生異構變化以外,很多能夠嵌入相鄰堿基之間影響堿基堆集作用的試劑,特別是片狀的染料分子.也能改變DNA的拓撲狀態(tài),最明顯的例子就是溴化乙錠(ethidium bromide)。例如以SV40的CCC分子與溴化乙錠的結合試驗為例,當沒有染料時,此DNA為負超螺旋,具有較高的沉降常數(shù)(21S);當加入染料分子與核苷酸之比為0.05時,沉降數(shù)降至l6S,此時DNA為沒有超螺旋的松弛形式;當染料分子和核苷酸的比值增加到0.09時,沉降常數(shù)又上升到大約21S,此時DNA分子為正超螺旋。不過要注意的是,溴化乙錠并沒有改變Lk值,只不過是由溴化乙錠分子的嵌入,增加了局部DNA二級結構的緊纏狀態(tài)。因而,隨著嵌入染料分子數(shù)的增多,起初表現(xiàn)為負超螺旋的減少與消失,隨后便是正超螺旋的增加。這與單鏈DNA結合蛋白促進負超螺旋轉變?yōu)榕轄罱Y構的情況是類似的。
拓撲異構酶(topoisomerase):通過切斷DNA的一條或兩條鏈中的磷酸二酯鍵,然后重新纏繞和封口來改變DNA連環(huán)數(shù)的酶。DNA促旋酶。