簡述TaqDNA聚合酶的熱穩(wěn)定性
相對分子質量為94的Taq DNA聚合酶的活性較高，大約為200000 U/mg，在合成DNA時有一個較高的最適溫度75～80℃。Taq DNA聚合酶雖然在90℃以上合成DNA的能力有限，但高溫時仍比較穩(wěn)定。有實驗證明，在92.5℃、95℃和97.5℃時，PCR混合物中的Taq DNA聚合酶分別經130 min、40 min和5～6 min后，仍可保持50%左右的活性，其半衰期較長。所以，在一個PCR預備試驗中，每次循環(huán)時上限溫度為95℃處理20S，則循環(huán)50次后Taq DNA聚合酶仍可保持65%的活性，能夠保證實驗的需要。
Taq DNA聚合酶具有很高的加工合成特性，在最適反應溫度時，dNTP的摻入速度為35～100 nt/（s．酶分子），最長擴增長度可達7.6 kb。在低溫條件下，Taq DNA聚合酶的活性明顯降低，導致此酶在模板內局部二級結構區(qū)域的延伸能力受阻或前進速率常數與解離常數的比值發(fā)生改變。在較高的溫度（95℃以上）時，很少有DNA合成；在體外，DNA在較高溫度時的合成速度受到引物或引物鏈與模板鏈雙鏈結構穩(wěn)定性的限制。
由于Taq DNA聚合酶的最適反應溫度高達75～80℃，故退火溫度和延伸溫度均可適當提高，這限制了非特異性擴增產物的出現，增加了PCR反應的特異性。
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