細(xì)胞外囊泡的檢測(cè)方法
外泌體具有磷脂雙分子膜結(jié)構(gòu),導(dǎo)致其沉降系數(shù)和蛋白質(zhì)聚集體有著很大的不同。而且外泌體膜表面存在特異性膜蛋白如CD9和CD81,前者被證實(shí)和腫瘤遷移有關(guān),后者與丙型肝炎病毒的侵染有關(guān)。而因?yàn)橥饷隗w具有這些顯著的易分離的特點(diǎn),我們可以通過(guò)密度梯度離心,親和層析等方法對(duì)外泌體進(jìn)行分離和純化。
細(xì)胞外囊泡的檢測(cè)方法
目前細(xì)胞外囊泡(EVs)的檢測(cè)方法主要有掃描電子顯微鏡、原子力顯微鏡、動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)、納米微粒追蹤分析術(shù)(NTA)、流式細(xì)胞儀和ELISA等,由于通量高、用時(shí)短、操作簡(jiǎn)單,ELISA和流式細(xì)胞儀是比較常用的方法。ELISA方法容易受其他可溶性抗原的干擾,而且無(wú)法知道囊泡的大小、數(shù)量等信息;流式細(xì)胞儀不僅可以檢測(cè)囊泡的大小、數(shù)量,而且通過(guò)細(xì)胞特異的標(biāo)記物染色可以檢測(cè)囊泡的來(lái)源,將囊泡進(jìn)行分類,因此,流式細(xì)胞儀理論上是進(jìn)行囊泡快速、高通量、多參數(shù)檢測(cè)的較優(yōu)選擇。然而,傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀針對(duì)的樣本主要是細(xì)胞,散射光的檢測(cè)極限通常是300-500nm,而大多數(shù)細(xì)胞外囊泡的直徑都在300nm以下,由于無(wú)法與背景噪音區(qū)分,直徑小于300nm的細(xì)胞外囊泡很難被檢測(cè)到,因此,囊泡數(shù)量往往被低估,檢測(cè)結(jié)果自然也不準(zhǔn)確。
齊岳生物提供一系列外泌體分離產(chǎn)品和工具,用于表征和分析其RNA和蛋白質(zhì)含量,以及體外和體內(nèi)追蹤,以幫助您進(jìn)一步了解這些迷人的外泌體。外泌體是包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡?(30–150nm),由所有體外和體內(nèi)細(xì)胞持續(xù)分泌。由于人體內(nèi)復(fù)雜的功能,包括細(xì)胞間通訊和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),外泌體正在改變研究。這些細(xì)胞外囊泡正在生長(zhǎng),這既是為了了解其生物學(xué)功能,也是為了將其用于實(shí)際應(yīng)用,如無(wú)創(chuàng)診斷和高級(jí)治療開(kāi)發(fā)。
產(chǎn)品介紹:
Exosome,中文名外泌體,是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),直徑大約40-120 nm。盡管外泌體在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物。然而近幾年,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對(duì)細(xì)胞分泌膜泡的興趣。
研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,如免疫中抗原呈遞、腫瘤的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),能很好的保護(hù)其包被的物質(zhì),且能靶向特定細(xì)胞或組織,因此又是一種很好靶向給藥系統(tǒng)。
外泌體可大致分為3大類:
(a)由質(zhì)膜分裂產(chǎn)生的微囊泡;
(b)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)形成并在多囊泡體與質(zhì)膜融合后釋放的外體;
(c)凋亡體a作為細(xì)胞凋亡過(guò)程中的囊泡重新釋放。低等生物,如細(xì)菌和寄生蟲,也能分泌外囊泡。