關于細胞培養(yǎng)的細胞凍存介紹
細胞密度達到80%~90%時,去培養(yǎng)基,10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放入細胞培養(yǎng)箱3min。加入lmlDMEM完全培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉移至15ml離心管。加入10ml PBS清洗細胞培養(yǎng)盤,轉移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。加入1ml凍存液(90%血清,10%DMSO),放入凍存盒內(盒內有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入一80℃冰箱內,過夜,第二天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放入液氮,可以保存三個月。
凍存液的配制:70%的完全培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。
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