毛細管電泳出倒峰現(xiàn)象
毛細管電泳: 是以彈性石英毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅(qū)動力,依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。 主要部件有0~30kV可調(diào)穩(wěn)壓穩(wěn)流電源,內(nèi)徑小于100μm(常用50~75μm)、長度一般為30~100cm的石英毛細管、電極槽、檢測器和進樣裝置。檢測器有紫外/可見分光檢測器、激光誘導熒光檢測器和電化學檢測器,前者最為常用。進樣方法有電動法(電遷移)、壓力法(正壓力、負壓力)和虹吸法。成套儀器還配有自動沖洗、自動進樣、溫度控制、數(shù)據(jù)采集和處理等部件。 毛細管電泳所用的石英毛細管柱,在pH值>3的情況下,其內(nèi)表面帶負電,與緩沖液接觸時形成雙電層,在高壓電場作用下,形成雙電層一側(cè)的緩沖液由于帶正電而向負極方向移動,從而形成電滲流。同時,在緩沖溶液中,帶電粒子在電場作用下,以各自不同速度向其所帶電荷極性相反方向移動,形成電泳。帶電粒子在毛細管緩沖液中的遷移速度等于電泳和電滲流的矢量和。各種粒子由于所帶電荷中國、質(zhì)量、體積以及形狀不同等因素引起遷移速度不同而實現(xiàn)分離。
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