| 產(chǎn)地類別：進口 | 供應商性質(zhì)：一般經(jīng)銷商 |
exoEasy Maxi Kit試劑盒從血漿、血清及細胞培養(yǎng)上清中純化外泌小體及其他細胞外囊泡（EV）
可分離獲得完整的exosome及其他細胞外囊泡
適用于功能性檢測及物理和生化分析
可在25分鐘內(nèi)純化獲得exosome及其他細胞外囊泡
可通過簡單的離心柱實驗方案平行處理多個樣品
可提取高達4 ml的血漿或血清，或者32 ml的細胞培養(yǎng)上清
exoEasy Maxi Kit使用了膜親和離心柱來高效地從血漿、血清、細胞培養(yǎng)上清及其他生物液體中提取獲得exosome及其他細胞外囊泡。Maxi規(guī)格的離心柱可允許處理大體積的樣品，包括高達4 ml的血漿或血清，或者32 ml的細胞培養(yǎng)上清。實驗流程非?？焖僖恢?，非常適用于提取EV進行exosome及其他細胞外囊泡的功能性分析。
Performance
用于純化外泌小體及其他細胞外囊泡的exoEasy實驗方案不僅比超速離心更加快捷，而且可獲得更潔凈的純化產(chǎn)物。掃描電子顯微鏡顯示兩種技術均可提供完整的預期尺寸的囊泡，不過通過超速離心法制得的樣品中還含有一些并不符合EV尺寸或外形的更小的結構。
提取獲得的囊泡具有完整的功能，可用于多種下游應用，包括細胞培養(yǎng)等工作。洗脫的囊泡的性質(zhì)和數(shù)量可通過多種不同的方法進行測定。其中包括電子顯微鏡、物理特征描述（例如，納米顆粒追蹤分析（NTA），或可調(diào)電阻脈沖感應（TRPS））、微粒分子成分分析（例如蛋白質(zhì)、核酸或脂類）等。由于如NTA或TRPS等微粒計數(shù)方法無法將囊泡與其他懸浮顆粒區(qū)分開，使用未經(jīng)處理的生物液體或仍含有其他顆粒物（例如，蛋白復合物）的粗制備樣品進行顆粒計數(shù)可能會明顯地高估囊泡數(shù)目。
Principle
exoEasy Kit在傳統(tǒng)的超速離心exosome或微泡提取方法的基礎上進行了改進，可在25分鐘內(nèi)獲得純化的細胞外囊泡。
exoEasy Maxi Kit使用了膜親和結合步驟來從血漿、及血清或細胞培養(yǎng)上清中分離exosome及其他EV。這種方法無法通過大小或細胞來源對EV進行區(qū)分，也不依賴于是否存在微粒表位。它運用了囊泡的通用生化特性來提取樣品中的所有細胞外囊泡（參見圖片使用NTA對由exoEasy Maxi Kit提取獲得的細胞外囊泡進行性質(zhì)分析）。因此，必須完全去除細胞、細胞碎片、凋亡小體等組分，可在開始提取步驟前對樣品進行離心或過濾等操作。
Exosome Diagnostics, Inc.開發(fā)的技術使用了離心柱及專門的緩沖液來從預過濾的生物液體中純化exosome；可處理高達4 ml的血漿或血清。對于細胞培養(yǎng)上清，經(jīng)試驗驗證可從高達32 ml的樣品中成功提取外泌小體（4次離心柱上樣步驟）。不過，上清中的囊泡濃度非常依賴于細胞類型及培養(yǎng)條件；因此我們建議，對于未經(jīng)過該試劑盒測試樣品材料，起始上清體積不要超過16 ml。更高的樣品體積可能導致囊泡的回收率降低。實驗流程非?？焖僖恢拢浅＿m用于exosome及其他細胞外囊泡的功能性分析。除囊泡之外的懸浮顆粒絕大部分可在結合及清洗步驟中被去除，這種顆粒包括了大體積的蛋白復合物，其在血漿及血清中含量很高。
Procedure
提取細胞外囊泡的總流程僅需要25分鐘。將預先過濾過的血漿、血清或細胞培養(yǎng)上清（去除了尺寸大于0.8 μm的顆粒）與Buffer XBP進行混合并結合在exoEasy膜親和離心柱上。對結合的外泌小體使用Buffer XWP進行清洗，并隨后使用400 μl Buffer XE（主要含無機鹽的水緩沖液）進行洗脫，隨后即可用于物理或生化分析。對于特定應用，如生物檢測等，可能需要進行額外的濃縮或緩沖液置換步驟。此步驟可通過孔徑尺寸為100 kDa或更小的超濾方法來實現(xiàn)。
Applications
exoEasy Kit非常適合于從血漿、血清、細胞培養(yǎng)上清及其他生物液體中提取微囊泡。提取獲得的囊泡可用于如下應用進行分析：
? 物理性質(zhì)分析（例如，NTA，TRPS）
? 電子顯微鏡
? 提取并分析DNA、RNA*、蛋白質(zhì)、脂類及其他成分
? 流式細胞術
? 抗體或熒光染料標記
? 受體細胞的攝取
*如需提取囊泡RNA，我們推薦使用exoEasy Maxi Kit試劑盒。
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注：該產(chǎn)品未在中華人民共和國食品藥品監(jiān)督管理部門申請醫(yī)療器械注冊和備案，不可用于臨床診斷或治療等相關用途。
