尿干化學(xué)試帶的檢測原理
尿的干化學(xué)試帶可檢測的項(xiàng)目有蛋白質(zhì)、葡萄糖、酮體、隱血、膽紅素、尿膽原、亞硝酸鹽、比重、PH值等。
?。?) 蛋白質(zhì)(PRO):PH指示劑蛋白誤差原理。干化學(xué)試紙中含有溴酚藍(lán)、枸櫞酸緩沖系統(tǒng)及表面活性劑,其中溴酚藍(lán)的PH閾為3.0-4.6,在PH3.2時(shí)會產(chǎn)生陰離子,與帶陽離子的蛋白質(zhì)結(jié)合后產(chǎn)生顏色反應(yīng),本試劑只適合于白蛋白的檢測,球蛋白濃度高時(shí)呈弱陽性。
?。?) 隱血(BLD):血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),具有過氧化物酶活性,可使試帶中的過氧化物(如過氧化氫茴香素)放出新生氧,將鄰聯(lián)甲苯胺受體氧化成藍(lán)色化合物。本試帶不能區(qū)分血紅蛋白和肌紅蛋白,與血紅蛋白起反應(yīng)時(shí)呈均勻的綠-藍(lán)色;與紅細(xì)胞起反應(yīng)時(shí)呈斑點(diǎn)狀綠-藍(lán)色。
?。?) 葡萄糖(GLU):葡萄糖氧化酶法。試紙中含有葡萄糖氧化酶、過氧化物酶、緩沖劑及顯色原。尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下,天生葡萄糖酸內(nèi)酯和過氧化氫,后者在過氧化物酶的催化下使色素原(如鄰聯(lián)甲苯胺、碘化鉀等)氧化而呈色。
(4) 酮體(KET):尿酮體包括乙酰乙酸、丙酮和β-羥丁酸。含酮體的尿液中加亞硝基鐵氰化鈉后,與氨液接觸時(shí)出現(xiàn)紫紅色環(huán)。
(5) 白細(xì)胞(LEU):粒細(xì)胞中存在酯酶,能作用于試紙中的吲哚酚酯(特異性酯酶底物),使后者開釋出吲哚酚,吲哚酚又與重氮鹽發(fā)生反應(yīng)形成紫色絡(luò)合物,根據(jù)顯色深淺換算白細(xì)胞數(shù)。本實(shí)驗(yàn)只能檢測出粒細(xì)胞,而不能檢測淋巴細(xì)胞。
?。?) 亞硝酸鹽(NIT):Griess實(shí)驗(yàn)原理。試紙中含有對氨基苯胂酸,被亞硝酸鹽重氮化而成重氮鹽,后者與1,2,3,4-四氫苯并喹啉-3酚偶聯(lián)產(chǎn)生粉紅色。當(dāng)尿液中含有硝酸鹽還原陽性菌(如大腸埃希氏菌)存在并繁殖時(shí),呈陽性反應(yīng)。而球菌、真菌或支原體感染時(shí)呈陰性反應(yīng)。
?。?) 比重(SG):試紙中含有高分子電解質(zhì)甲乙烯酸/馬來酸及指示劑麝香草酚藍(lán)等,高分子電解質(zhì)的COONˉ基與尿中的電解質(zhì)發(fā)生反應(yīng)時(shí)開釋出H+,后著使指示劑變色。
?。?) 膽紅素(BIL):重氮反應(yīng)原理。試紙中含有2,4,2-三氯苯胺重氮鹽,在強(qiáng)酸介質(zhì)中葡萄糖醛酸膽紅素與2,4,2-三氯苯胺重氮鹽起偶聯(lián)反應(yīng)呈紫紅色。
?。?) 尿膽原(UBG):重氮反應(yīng)原理。