熒光素酶報(bào)告基因與綠色熒光蛋白（GFP）有什么區(qū)別
1。兩者的結(jié)果檢測方法不同。gfp綠色熒光蛋白，很直觀，能夠直接檢到熒光，在普通的細(xì)胞培養(yǎng)條件下都能夠觀察到，對(duì)細(xì)胞的生命活動(dòng)和其他并行的實(shí)驗(yàn)安排影響很小。熒光素酶報(bào)告基因使用起來比gfp多一個(gè)步驟，因?yàn)闊晒馑孛甘莻€(gè)酶，不發(fā)熒光，發(fā)熒光的是它的底物，熒光素。熒光素在細(xì)胞里（要說螢火蟲細(xì)胞我就不知道了哦）是沒有的。所以檢測熒光素酶的通常步驟是裂解細(xì)胞，釋放熒光素酶，與熒光素及其他所需化學(xué)物質(zhì)混合，才得到熒光。現(xiàn)在雖然也有活細(xì)胞內(nèi)檢測熒光素酶的手段，但要將熒光素送入活細(xì)胞，本身就已要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行相當(dāng)?shù)母蓴_。所以一般來說熒光素酶實(shí)驗(yàn)的同一批細(xì)胞不適合再做其他并行實(shí)驗(yàn)。
2。兩者的結(jié)果含義不同。gfp如果說是定量檢測表達(dá)蛋白的話，這個(gè)定量只能夠指，表達(dá)的細(xì)胞是多少個(gè)，不表達(dá)的細(xì)胞是多少個(gè)。gfp對(duì)于單個(gè)細(xì)胞來說，就有陽性和陰性兩種結(jié)果罷了。gfp不能夠定量地告訴你，這個(gè)/群細(xì)胞里的表達(dá)量是多高還是多低。熒光素酶就能夠定量地得到表達(dá)量/表達(dá)水平的數(shù)值，但這個(gè)數(shù)值是相對(duì)于一群細(xì)胞來說，而不是對(duì)于單個(gè)細(xì)胞。所以熒光素酶常常用來研究啟動(dòng)子的功能與調(diào)控，因?yàn)閱?dòng)子對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控可以是漸變的，而不是簡單的開和關(guān)兩種狀態(tài)。
