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熒光素和熒光素酶是什么

2022.4.27

熒光素也就是FDA
FDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長分別為488
nm和530
nm。
熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中最有代表性的是一種學名為Photinus
pyralis的螢火蟲體內的熒光素酶。在相應化學反應中,熒光的產生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M一步加速反應(與肌肉收縮的情況相似)。[1]熒光生成反應通常分為以下兩步:
螢光素
+
ATP

螢光素化腺苷酸(luciferyl
adenylate)
+
PPi
螢光素化腺苷酸
+
O2

氧熒光素
+
AMP
+

這一反應非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。
熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應。最為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotus
olearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominal
trachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關昆蟲)則有更多,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學研究很有用。目前研究得最透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinus
pyralis)。

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