熒光素大全:熒光素及其衍生物產(chǎn)品匯總(一)
熒光素衍生物具有高吸收率,出色的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性,是流式細(xì)胞儀和免疫熒光法等生物檢測(cè)中最常用的熒光標(biāo)記之一。最廣泛使用的熒光素包括用于標(biāo)記蛋白質(zhì)(特別是抗體)的異硫氰酸熒光素(FITC)和用于標(biāo)記肽和寡核苷酸的羧基熒光素(5-FAM和5(6)-FAM)。 我們提供各類(lèi)的熒光素染料,底物和結(jié)合物,以及一系列具有改良特性的卓越iFluor?熒光標(biāo)記染料,這些染料針對(duì)細(xì)胞標(biāo)記和檢測(cè)進(jìn)行了優(yōu)化。
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光譜性質(zhì):
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表1. 5-異硫氰酸熒光素(5-FITC)的光譜性質(zhì)
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指標(biāo) | 數(shù)值 |
激光線(xiàn): | 488 nm激光 |
篩選器集: | FITC |
Ex / Em(nm): | 494/525 nm |
消光系數(shù)(ε): | 75,000 cm-1?M?-1 |
量子產(chǎn)率(Φ): | 0.79 |
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? ? ? ?圖1. 5-異硫氰酸熒光素(5-FITC)* CAS 3326-32-7 *(Cat:121)的激發(fā)和發(fā)射光譜。
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? ? ? ?iFluor?488-FITC:AlexaFluor?488的卓越替代品
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? ? ? ?盡管基于熒光素的染料和綴合物有亮綠色熒光,但仍可能會(huì)限制其在某些應(yīng)用中的使用。具有相同光譜特性的iFluor?488染料可在較寬的摩爾范圍內(nèi)產(chǎn)生更亮,更光穩(wěn)定的結(jié)合物,且對(duì)pH值不敏感。iFluor?488染料分子能以高摩爾比與生物分子結(jié)合,同時(shí)產(chǎn)生最小的自發(fā)淬滅(圖2和圖3)。
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? ? ? ?圖2. 用GAM IgG-FITC和GAM IgG-iFluor?488標(biāo)記的HeLa細(xì)胞之間的熒光強(qiáng)度比較。
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? ? ? ?圖3. iFluor?488山羊抗小鼠IgG和FITC山羊抗小鼠IgG的光漂白速率的比較。HeLa細(xì)胞的微管蛋白用iFluor?488 GAM-IgG(頂部)或FITC GAM-IgG(底部系列)標(biāo)記。在Keyence X710熒光顯微鏡上以60秒的間隔拍攝圖像。TFI代表由ImageJ軟件計(jì)算的總熒光強(qiáng)度。
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? ? ? ?表2. 用于標(biāo)記生物分子的可用iFluor?488反應(yīng)染料
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產(chǎn)品 | 化學(xué) 反應(yīng)性 | 反應(yīng) 部分 | Ex (nm) | Em (nm) | ε1 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
iFluor?488琥珀酰亞胺酯 | 胺 | 琥珀酰亞胺酯 | 491 | 516 | 75000 | 1mg | 1023 |
iFluor?488馬來(lái)酰亞胺 | 硫醇 | 馬來(lái)酰亞胺 | 491 | 516 | 75000 | 1mg | 1062 |
iFluor?488炔烴 | 疊氮化物 | 炔烴 | 491 | 516 | 75000 | 1mg | 999 |
iFluor?488胺 | 醛,羧酸,酮 | 胺 | 491 | 516 | 75000 | 1mg | 1072 |
iFluor?488疊氮化物 | 炔烴 | 疊氮化物 | 491 | 516 | 75000 | 1mg | 1000 |
iFluor?488酰肼 | 醛,羧酸,酮 | 酰肼 | 491 | 516 | 75000 | 1mg | 1082 |
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? ? ? ?注意:ε= 在其最大吸收波長(zhǎng)處的摩爾消光系數(shù)(單位= cm -1 M -1)