蛋白質(zhì)含量的測(cè)定方法有哪些
蛋白質(zhì)含量測(cè)定的方法有微量凱氏定氮法、雙縮脲法、folin―酚試劑法、考馬斯亮蘭法、紫外吸收法等。
1、微量凱氏定氮法：含氮有機(jī)物即分解產(chǎn)生氨（消化），氨又與硫酸作用，變成硫酸銨。經(jīng)強(qiáng)堿堿化使之分解放出氨，借蒸汽將氨蒸至酸液中，根據(jù)此酸液被中和的程度可計(jì)算得樣品之氮含量。
2、雙縮脲法：雙縮脲是兩個(gè)分子脲經(jīng)180℃左右加熱，放出一個(gè)分子氨后得到的產(chǎn)物。在強(qiáng)堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物，稱為雙縮脲反應(yīng)。
3、folin―酚試劑法：這種蛋白質(zhì)測(cè)定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應(yīng)用最廣泛的一種方法，由于其試劑乙的配制較為困難，近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。
4、考馬斯亮蘭法：1976年由bradford建立的考馬斯亮蘭法，是根據(jù)蛋白質(zhì)與染料相結(jié)合的原理設(shè)計(jì)的。這一方法是目前靈敏度最高的蛋白質(zhì)測(cè)定法。
5、紫外吸收法：蛋白質(zhì)分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基的苯環(huán)含有共軛雙鍵，使蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì)。吸收高峰在280nm處，其吸光度（即光密度值）與蛋白質(zhì)含量成正比。
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