有限稀釋法的程序

①制備飼養(yǎng)細(xì)胞懸液

②轉(zhuǎn)染了重組質(zhì)粒后的細(xì)胞計(jì)數(shù)，并調(diào)細(xì)胞數(shù)在1～5×10３/ml

③取130個(gè)細(xì)胞放入6.5ml含飼養(yǎng)細(xì)胞完全培養(yǎng)液，即20個(gè)細(xì)胞/ml，100μl/孔加A、B、C三排為每孔2個(gè)細(xì)胞。余下2.9ml細(xì)胞懸液補(bǔ)加2.9ml含飼養(yǎng)細(xì)胞的完全培養(yǎng)液，細(xì)胞數(shù)為10個(gè)/ml，100μl/孔加D、E、F三排，為每孔1個(gè)細(xì)胞。余下2.2ml細(xì)胞懸液補(bǔ)加2.2ml含飼養(yǎng)細(xì)胞的完全培養(yǎng)液，細(xì)胞數(shù)5個(gè)/ml，100μl/孔，加G、H兩排，為每孔0.5個(gè)細(xì)胞。

④培養(yǎng)4～5天后，在倒置顯微鏡上可見(jiàn)到小的細(xì)胞克隆，補(bǔ)加完全培養(yǎng)液200μl/孔。

⑤第8～9天時(shí)，肉眼可見(jiàn)細(xì)胞克隆。