問(wèn)：

在本版里有看到過(guò)有關(guān)caspase-3的檢測(cè)方法

（1）：免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)caspase-3蛋白的表達(dá)，用懸浮的細(xì)胞

（2）：western blot 理想結(jié)果：caspase-3有32ＫＤ的條帶外，還出現(xiàn)了20ＫＤ和10ＫＤ大小的條帶，表明caspase- 3被活花

（3）：RT-PCR檢測(cè)mRNA的表達(dá)，用凝膠成像分析系統(tǒng)處理，可以半定量。

請(qǐng)問(wèn)是否有更詳細(xì)一些的實(shí)驗(yàn)步驟

還有這3種方法之間有沒(méi)有什么優(yōu)缺點(diǎn)，那種比較容易出結(jié)果。

答：

各種方法都有自己的優(yōu)缺點(diǎn)，關(guān)鍵是根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇適合的方法。

檢測(cè)mRNA水平的表達(dá)，RT－PCR是廣泛應(yīng)用的比較好的方法；

檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)，可以選擇免疫細(xì)胞化學(xué)，Westen－Blot等，前者可以在細(xì)胞內(nèi)定位但定量效果不佳，后者操作比較復(fù)雜，如想在較高水平雜志發(fā)表論文最好選擇此方法。檢測(cè)Caspase－3活性還可以選用流式細(xì)胞儀來(lái)做，且可同時(shí)測(cè)定Caspase－8等的活性（多通路）。