異源蛋白質(zhì)在細(xì)菌中表達是目前使用的主要的蛋白生產(chǎn)系統(tǒng)。大腸桿菌一直是最經(jīng)濟的系統(tǒng)之一。然而為了生產(chǎn)需要特異修飾、胞外分泌或有特異折疊需要的蛋白質(zhì)，其他表達系統(tǒng)也是需要的。真核細(xì)胞在表達原核來源的基因、真核基因的cDNA拷貝或其他無內(nèi)含子的基因時可能表現(xiàn)很多特異問題。富含AT的基因在很多真核細(xì)胞中表達時會遭遇很劇烈的障礙。主要的真核信號序列如 加poly-A的位點、酵母轉(zhuǎn)錄終止位點和真核mRNA去穩(wěn)定序列都是富含AT的。內(nèi)含子序列也趨向于富含AT，盡管他們有參與剪切過程的很特異的識別序列。雖然絕大多數(shù)原核基因沒有剪切或聚腺苷過程，但這些真核過程需要的保守序列可能存在于原核基因中，因此當(dāng)這些基因在真核細(xì)胞中表達時可能引起特異的問題。而且諸如哺乳動物和單子葉植物細(xì)胞的特異真核表達系統(tǒng)可能不能有效地表達無內(nèi)含子的基因。 真核mRNA在離開細(xì)胞核進而在胞漿的核糖體上被翻譯前需要特異的處理和修飾。這些過程包括去除內(nèi)含子、5'端甲基化帽子形成和3'端加poly-A。內(nèi)含子去除需要5'剪切位點、G75/G100U100A65AG65U保守序列、3'剪切位點、富含密啶NC66A100G100/G56保守序列和C72T98R77A100Y75保守序列。有效的加poly-A和mRNA剪切需要一個由兩個部分組成的信號：加poly-A保守序列AAUAAA和在切割位點內(nèi)的50個堿基的富含GT的序列。酵母真核轉(zhuǎn)錄終止序列（幾個不同的富含AT序列,如含TTTTTATA，TATATA，TACATA，TAGTAGTA的一個38bp區(qū)域）被研究的最清楚。這些結(jié)果來自對酵母突變體CYCI mRNA的mRNA水平和相對長度的確定的實驗。近期用in vivo質(zhì)粒穩(wěn)定性分析的研究結(jié)果證明：TATATA似乎和原始的38bp野生型區(qū)域一樣有效地終止轉(zhuǎn)錄，而TAGATATATATGTAA和TACATA效率差些，TTTTTTTATA幾乎沒有效率。所有這些序列在反方向時沒有終止轉(zhuǎn)錄功能。不幸的是幾乎沒有其他真核表達系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄終止序列方面的信息。 內(nèi)含子對幾個哺乳動物基因的正常表達是必需的，包括Beta-球蛋白、SV40 late mRNA和二氫葉酸還原酶基因。單子葉植物細(xì)胞充分表達乙醇脫氫酶的cDNA拷貝、報告基因氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶、Beta葡萄糖苷酸酶和其他缺乏內(nèi)含子的基因時也依賴內(nèi)含子。轉(zhuǎn)錄區(qū)域內(nèi)引入內(nèi)含子可以通過未確定的轉(zhuǎn)錄后機制增強表達。（免疫球蛋白基因）內(nèi)含子可能也包含轉(zhuǎn)錄增強子，因此通過轉(zhuǎn)錄機制增強表達。

?