[實驗原理] 制備電泳與普通的分析電泳在原理上沒有什么不同，只是用的凝膠厚些、加的樣品量大些罷了。因為制備電泳的膠厚，電泳時有個散熱問題，電泳后還有把所要分離的蛋白從膠中洗脫下來的問題。為了提高制備電泳的效率，有些公司（如BIO-RAD）生產(chǎn)了專為制備電泳設(shè)計的電泳槽。我們的實驗用非變性條件下的聚丙烯酰胺凝膠電泳制備GFP，在整個的電泳過程中GFP始終維持其天然活性。電泳結(jié)束后，不用染色處理，在紫光照射下可以很容易地將發(fā)綠色熒光的GFP條帶從凝膠上切下來。

[實驗操作] 1、用1.5毫米夾條的玻璃板做膠，分離膠的濃度仍為12%，注意用不含SDS的非變性系統(tǒng)緩沖液配膠，配濃縮膠時也同樣。 2、做濃縮膠時不加梳子，而是做分離膠那樣用水封頂，使?jié)饪s膠的頂部形成一平面。 3、制備電泳的蛋白樣品與前次免疫印跡的相同，用非變性的樣品緩沖液做樣，樣品不加熱處理。上樣前要充分離心(1.5mL 離心管 ，12000rpm，5分鐘），勿使所加樣品中含有沉淀。 4、上樣量0.2-0.4mL，上樣后要使樣品的高度在整個濃縮膠面上均勻分布。 5、在樣品完全走進(jìn)濃縮膠前電流不要調(diào)得過大，以免樣品發(fā)熱，產(chǎn)生明顯的對流。待樣品完全走進(jìn)濃縮膠后可以加高電壓，但不要超過150V，以防過熱。 6、電泳結(jié)束后，取下并打開玻璃板“三明治”，在紫光燈下用刀片將發(fā)綠色熒光的條帶從膠上切下，切成小段，放于干凈的1.5mL 離心管 中，冷凍保存。